Updated on 2022/03/28

写真a

 
FURUHASHI Kazuhiro
 
Organization
Nagoya University Hospital Nephrology Lecturer of hospital
Title
Lecturer of hospital

Degree 1

  1. 医学博士 ( 2013.5   名古屋大学 ) 

Research Interests 5

  1. 腎臓

  2. 再生医療

  3. 腎臓

  4. 再生医療

  5. 免疫学

Research Areas 3

  1. Life Science / Nephrology  / Nephrology

  2. Life Science / Nephrology  / Nephrology

  3. Life Science / Immunology

Current Research Project and SDGs 2

  1. 再生医療

  2. 腎臓内科

Research History 10

  1. Nagoya University   Nagoya University Hospital Nephrology   Lecturer of hospital

    2021.6

  2. Nagoya University   Nagoya University Hospital Nephrology   Assistant Professor

    2020.4 - 2021.5

  3. Nagoya University   Nagoya University Hospital Department of Blood Purification   Assistant professor of hospital

    2019.4 - 2020.3

  4. Nagoya University   Graduate School of Medicine Center for Research of Laboratory Animals and Medical Research Engineering Division   Designated assistant professor

    2018.8 - 2019.3

  5. Columbia University   Columbia Center for Translational Immunology   Research Scientist

    2015.9 - 2018.7

  6. Harvard Medical School and Brigham and Women's Hospital   Pathology   Postdoc

    2014.1 - 2015.8

      More details

    Country:United States

  7. 名古屋大学大学院医学系研究科   腎臓内科

    2008.4 - 2014.1

      More details

    Country:Japan

  8. 中津川市民病院   腎臓内科

    2007.4 - 2008.3

      More details

    Country:Japan

  9. 春日井市民病院   腎臓内科

    2003.4 - 2007.3

      More details

    Country:Japan

  10. 春日井市民病院   研修医

    2001.5 - 2003.3

      More details

    Country:Japan

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Education 1

  1. Nagoya University   Faculty of Medicine

    1995.4 - 2001.3

      More details

    Country: Japan

Professional Memberships 5

  1. The Japanese Society of Internal Medicine

  2. The Japanese Society for Dialysis Therapy

  3. Japanese Society of Nephrology

  4. The Japanese Society of Inflammation and Regeneration

  5. American Society of Nephrology

Awards 6

  1. 進行性腎炎におけるTNFR1,TNFR2の役割

    2013   アステラス病態代謝研究会  

     More details

    Award type:Award from publisher, newspaper, foundation, etc.  Country:Japan

  2. 脂肪由来間葉系幹細胞を用いた壊死性半月体形成性腎炎への新たな治療法の確立とその作用機序の解明

    2011   第3回腎疾患と高血圧研究会  

     More details

    Award type:Award from publisher, newspaper, foundation, etc.  Country:Japan

  3. 急速進行性糸球体腎炎における免疫調整性(M2)マクロファージの役割― マクロファージに関するパラダイムシフト

    2010   愛知腎臓財団  

     More details

    Award type:Award from publisher, newspaper, foundation, etc.  Country:Japan

  4. 脂肪由来間葉系幹細胞(ASC)を用いた難治性腎疾患・自己免疫疾患への新たな治療開発

    2010   分子腎臓フォーラム  

     More details

    Award type:Award from publisher, newspaper, foundation, etc.  Country:Japan

  5. New Strategy for autoimmune disease and nephritis MSCs have immunoregulatory properties

    2009   愛知腎臓財団  

     More details

    Award type:Award from publisher, newspaper, foundation, etc.  Country:Japan

  6. 慢性腎臓疾患に対する新規再生医療の開発

    2007   那古野医学振興会研究奨励金  

     More details

    Award type:Award from publisher, newspaper, foundation, etc.  Country:Japan

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Papers 16

  1. Photoactivatable Cre recombinase 3.0 for in vivo mouse applications. International journal

    Morikawa K, Furuhashi K, de Sena-Tomas C, Garcia-Garcia AL, Bekdash R, Klein AD, Gallerani N, Yamamoto HE, Park SE, Collins GS, Kawano F, Sato M, Lin CS, Targoff KL, Au E, Salling MC, Yazawa M

    Nature communications   Vol. 11 ( 1 ) page: 2141 - 2141   2020.5

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

    Optogenetic genome engineering tools enable spatiotemporal control of gene expression and provide new insight into biological function. Here, we report the new version of genetically encoded photoactivatable (PA) Cre recombinase, PA-Cre 3.0. To improve PA-Cre technology, we compare light-dimerization tools and optimize for mammalian expression using a CAG promoter, Magnets, and 2A self-cleaving peptide. To prevent background recombination caused by the high sequence similarity in the dimerization domains, we modify the codons for mouse gene targeting and viral production. Overall, these modifications significantly reduce dark leak activity and improve blue-light induction developing our new version, PA-Cre 3.0. As a resource, we have generated and validated AAV-PA-Cre 3.0 as well as two mouse lines that can conditionally express PA-Cre 3.0. Together these new tools will facilitate further biological and biomedical research.

    DOI: 10.1038/s41467-020-16030-0

    PubMed

  2. Generation of functional lungs via conditional blastocyst complementation using pluripotent stem cells.

    Mori M, Furuhashi K, Danielsson JA, Hirata Y, Kakiuchi M, Lin CS, Ohta M, Riccio P, Takahashi Y, Xu X, Emala CW, Lu C, Nakauchi H, Cardoso WV

    Nature medicine   Vol. 25 ( 11 ) page: 1691 - 1698   2019.11

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

    DOI: 10.1038/s41591-019-0635-8

    PubMed

  3. CD150<sup>high</sup> Bone Marrow Tregs Maintain Hematopoietic Stem Cell Quiescence and Immune Privilege via Adenosine. Reviewed

    Hirata Y, Furuhashi K, Ishii H, Li HW, Pinho S, Ding L, Robson SC, Frenette PS, Fujisaki J

    Cell stem cell   Vol. 22 ( 3 ) page: 445 - 453.e5   2018.3

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

    DOI: 10.1016/j.stem.2018.01.017

    PubMed

  4. Microanatomical dissection of human intestinal T-cell immunity reveals site-specific changes in gut-associated lymphoid tissues over life.

    Senda T, Dogra P, Granot T, Furuhashi K, Snyder ME, Carpenter DJ, Szabo PA, Thapa P, Miron M, Farber DL

    Mucosal immunology   Vol. 12 ( 2 ) page: 378 - 389   2019.3

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

    DOI: 10.1038/s41385-018-0110-8

    PubMed

  5. Neutrophil Fc gamma RIIA promotes IgG-mediated glomerular neutrophil capture via Abl/Src kinases Reviewed

    Hiroshi Nishi, Kazuhiro Furuhashi, Xavier Cullere, Gurpanna Saggu, Mark J. Miller, Yunfeng Chen, Florencia Rosetti, Samantha L. Hamilton, Lihua Yang, Spencer P. Pittman, Jiexi Liao, Jan M. Herter, Jeffrey C. Berry, Daniel J. DeAngelo, Cheng Zhu, George C. Tsokos, Tanya N. Mayadas

    JOURNAL OF CLINICAL INVESTIGATION   Vol. 127 ( 10 ) page: 3810 - 3826   2017.10

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)   Publisher:AMER SOC CLINICAL INVESTIGATION INC  

    The kidney glomerular capillaries are frequent sites of immune complex deposition and subsequent neutrophil accumulation in post-infectious and rapidly progressive glomerulonephritis. However, the mechanisms of neutrophil recruitment remain enigmatic, and there is no targeted therapeutic to avert this proximal event in glomerular inflammation. The uniquely human activating Fc receptor Fc gamma RIIA promotes glomerular neutrophil accumulation and damage in anti-glomerular basement membrane-induced (anti-GBM-induced) glomerulonephritis when expressed on murine neutrophils. Here, we found that neutrophils are directly captured by immobilized IgG antibodies under physiological flow conditions in vitro through Fc gamma RIIA-dependent, Abl/Src tyrosine kinase-mediated F-actin polymerization. Biophysical measurements showed that the lifetime of Fc gamma RIIA-IgG bonds increased under mechanical force in an F-actin-dependent manner, which could enable the capture of neutrophils under physiological flow. Kidney intravital microscopy revealed that circulating neutrophils, which were similar in diameter to glomerular capillaries, abruptly arrested following anti-GBM antibody deposition via neutrophil Fc gamma RIIA and Abl/Src kinases. Accordingly, inhibition of Abl/Src with bosutinib reduced Fc gamma RIIA-mediated glomerular neutrophil accumulation and renal injury in experimental, crescentic anti-GBM nephritis. These data identify a pathway of neutrophil recruitment within glomerular capillaries following IgG deposition that may be targeted by bosutinib to avert glomerular injury.

    DOI: 10.1172/JCI94039

    Web of Science

    PubMed

  6. Fructose increases the activity of sodium hydrogen exchanger in renal proximal tubules that is dependent on ketohexokinase

    Hayasaki Takahiro, Ishimoto Takuji, Doke Tomohito, Hirayama Akiyoshi, Soga Tomoyoshi, Furuhashi Kazuhiro, Kato Noritoshi, Kosugi Tomoki, Tsuboi Naotake, Lanaspa Miguel A, Johnson Richard J, Maruyama Shoichi, Kadomatsu Kenji

    JOURNAL OF NUTRITIONAL BIOCHEMISTRY   Vol. 71   page: 54 - 62   2019.9

     More details

    Language:Japanese   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

    DOI: 10.1016/j.jnutbio.2019.05.017

    Web of Science

    Scopus

    PubMed

  7. Serum-Starved Adipose-Derived Stromal Cells Ameliorate Crescentic GN by Promoting Immunoregulatory Macrophages Reviewed

    Furuhashi K, Tsuboi N, Shimizu A, Katsuno T, Kim H, Saka Y, Ozaki T, Sado Y, Imai E, Matsuo S, Maruyama S.

    Journal of the American Society of nephrology   Vol. 24   page: 587-603   2013.3

     More details

    Authorship:Lead author   Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

    DOI: 10.1681

  8. Adipose derived stromal cells cultured in a low serum medium, but not bone marrow derived stromal cells, impede xenoantibody production. Reviewed

    5. Saka Y, Furuhashi K, Katsuno T, Kim H, Ozaki T, Iwasaki K, Haneda M, Sato W, Tsuboi N, Ito Y, Matsuo S, Kobayashi T, Maruyama S.

    Xenotransplantation   Vol. 18   page: 196-208   2011.6

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

    DOI: 10.1111

  9. Acute kidney injury and cytokines

    Furuhashi K

    Acute Kidney Injury and Regenerative Medicine     page: 333 - 351   2020.1

     More details

    Language:Japanese   Publisher:Acute Kidney Injury and Regenerative Medicine  

    Cytokines and chemokines are potential signaling molecules that maintain homeostasis by activating intracellular communication. Cytokines orchestrate various processes, ranging from cellular survival, proliferation, and chemotaxis for tissue repair to regulation of inflammation. Extracellular vesicles (EVs), which are cell-derived membrane particles such as exosomes and microvesicles, may also play crucial roles similar to cytokines. The kidneys are highly susceptible to intrinsic oxidative stress resulting from ischemia and to the excessive inflammatory response resulting from systemic autoimmunity. These types of stress may eventually result in the development of acute kidney injury (AKI). In this setting, the skewed cytokine profile produced by macrophages and lymphocytes disrupts the reciprocal relationship for regulating tissue repair and remodeling due to amplification of a physiological vicious loop. We have so far shown that AKI induces the secretion of midkine (MK) and CD147/basigin, which are responsible for skewed cytokine production. MK and CD147/basigin secreted by tubular epithelial cells promote the recruitment of macrophages and neutrophils, respectively, which are accompanied by monocyte chemotactic protein- 1, transforming growth factor-β, E cadherin, and extracellular matrix metalloproteinase inducer. This chapter will present the functions of macrophage-related cytokines and EVs and summarize our findings on how MK and CD147/basigin are involved in the pathogenesis of AKI.

    DOI: 10.1007/978-981-15-1108-0_23

    Scopus

  10. Therapeutic Application of Adipose Derived Mesenchymal Stem Cells for Kidney Diseases

    Furuhashi Kazuhiro, Maruyama Shoichi

    Nihon Naika Gakkai Zasshi   Vol. 109 ( 4 ) page: 812 - 818   2020

     More details

    Language:Japanese   Publisher:The Japanese Society of Internal Medicine  

    DOI: 10.2169/naika.109.812

    CiNii Research

  11. Urinary soluble CD163 level reflects glomerular inflammation in human lupus nephritis Reviewed

    Endo N, Tsuboi N, Furuhashi K, Shi Y, Du Q, Abe T, Hori M, Imaizumi T, Kim H, Katsuno T, Ozaki T, Kosugi T, Matsuo S,Maruyama S.

    Nephrology Dialysis Transplantation   Vol. 31   page: 2023-2033   2016.12

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

    DOI: 10.1093

  12. Transfusion of CD206+ M2 Macrophages Ameliorates Antibody Mediated Glomerulonephritis in Mice Reviewed

    Du Q, Tsuboi N, Shi Y, Ito S, Sugiyama Y, Furuhashi K, Endo N, Kim H, Katsuno T, Akiyama S, Matsuo S, Isobe K, Maruyama S.

    The American Journal of Pathology   Vol. 186   page: 3176-3188   2016.8

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

  13. Midkine Regulates BP through Cytochrome P450 Derived Eicosanoids Reviewed

    Sato Y, Sato W, Maruyama S, Wilcox C, Falck J, Masuda T, Kosugi T, Kojima H, Maeda K, Furuhashi K, Ando M, Imai E, Matsuo S, Kadomatsu K.

    Journal of the American Society of nephrology   Vol. 26   page: 1806-1815   2015.8

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

  14. Pristane-Induced Granulocyte Recruitment Promotes Phenotypic Conversion of Macrophages and Protects against Diffuse Pulmonary Hemorrhage in Mac-1 Deficiency Reviewed

    Shi Y, Tsuboi N, Furuhashi K, Du Q, Horinouchi A, Maeda K, Kosugi T, Matsuo S, Maruyama S.

    The Journal of Immunology     page: 5129-5139   2014.11

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

    DOI: 10.4049

  15. Rat adipose tissue derived stem cells attenuate peritoneal injuries in rat zymosan induced peritonitis accompanied by complement activation Reviewed

    Kim H, Mizuno M, Furuhashi K, Katsuno T, Ozaki T, Yasuda K, Tsuboi N, Sato W, Suzuki Y, Matsuo S, Ito Y, Maruyama S.

    Cytotherapy   Vol. 16   page: 357-368   2013.12

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

    DOI: 10.1016

  16. Low Serum Cultured Adipose Tissue-Derived Stromal Cells Ameliorate Acute Kidney Injury in Rats Reviewed

    Katsuno T, Ozaki T, Saka Y, Furuhashi K, Kim H, Yasuda K, Yamamoto T, Sato W, Tsuboi N, Mizuno M, Ito Y, Imai E, Matsuo S, Maruyama S.

    Cell transplantation   Vol. 22   page: 287-297   2013.2

     More details

    Language:English   Publishing type:Research paper (scientific journal)  

    DOI: 10.3727

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Books 5

  1. 脂肪由来幹細胞を用いた腎炎の治療

    田中章仁( Role: Joint author)

    医学のあゆみ・医歯薬出版  2020.10 

  2. 間葉系幹細胞を用いた腎疾患治療法の開発

    古橋和拡・田中章仁・唐澤宗稔・丸山彰一( Role: Joint author)

    科学評論社  2020.8 

  3. Acute Kidney Injury and Cytokines

    ( Role: Joint author)

    Acute Kidney Injury and Regenerative Medicine  2020.5 

     More details

    Total pages:p333-351   Language:English

  4. 脂肪由来間葉系幹細胞を用いた腎疾患治療

    古橋和拡・丸山彰一( Role: Joint author)

    日本内科学会雑誌  2020.4 

     More details

    Language:Japanese

  5. Annual Review 腎臓

    古橋和拡、丸山彰一、坪井直毅( Role: Joint author)

    中外医学社  2012.1 

     More details

    Language:Japanese Book type:Scholarly book

    脂肪由来間葉系幹細胞(ASC)を用いた難治性腎疾患・自己免疫疾患への新たな治療開発

Presentations 8

  1. Elucidation of therapeutic mechanism of adipose-derived mesenchymal stem cells against glomerulonephritis model by focusing on in vivo cell dynamics Invited

    Kazuhiro Furuhashi

    2021.12.3 

     More details

    Event date: 2021.12

    Language:Japanese   Presentation type:Symposium, workshop panel (nominated)  

    Country:Japan  

  2. 脂肪間葉系幹細胞を用いた腎炎治療の可能性 〜治療特性とその作用機序〜 Invited

    古橋和拡

    再生医療学会  2021.3.13 

     More details

    Event date: 2021.3

    Language:Japanese   Presentation type:Public lecture, seminar, tutorial, course, or other speech  

  3. MESENCHYMAL STEM CELLS EXERT RENOPROTECTION VIA EXTRACELLULAR VESICLE- MEDIATED MODULATION OF M2 MACROPHAGES AND SPLEEN-KIDNEY NETWORK International conference

    Kazuhiro Furuhashi

    The International Society for Stem Cell Research (ISSCR)   2021.10.28  The International Society for Stem Cell Research (ISSCR)

     More details

    Event date: 2021.10

    Language:English   Presentation type:Poster presentation  

    Venue:Tokyo   Country:Japan  

  4. Serum-starved adipose-derived stromal cells ameliorate rat crescentic glomerulonephritis by promoting immunoregulatory macrophages International conference

    Kazuhiro Furuhashi, Naotake Tsuboi, Asuka Shimizu, Yiqin Shi, Hangsoo Kim, Takayuki Katsuno, Yosuke Saka, Takenori Ozaki, Waichi Sato, Enyu Imai, Seiichi Matsuo, Shoichi Maruyama

    The Asia Pacifific Meeting of Vasculitis and ANCA Workshop 2012 5th International Conference on Autoimmunity: Mechanisms and Novel Treatments International Society for Stem Cell Research 10th Annual Meeting International Society for Stem Cell Research 11th Annual Meeting 

     More details

    Event date: 2013.12

    Language:English   Presentation type:Poster presentation  

    Country:United States  

  5. 脂肪由来間葉系幹細胞を用いた壊死性半月体形成性腎炎への新たな治療法の確立とその作用機序の解明

    古橋 和拡,坪井 直毅,清水明日花,勝野 敬之,金  恒秀,松尾 清一,丸山 彰一

    第33回日本炎症・再生医学会 

     More details

    Event date: 2012.7

    Language:Japanese   Presentation type:Symposium, workshop panel (public)  

    Country:Japan  

  6. LOW SERUM CULTURED ADIPOSE-DERIVED MESENCHYMAL STEM CELLS AMELIORATE CRESCENTIC GLOMERULONEPHRITIS BY FUNCTIONAL POLARIZATION OF MACROPHAGES INTO IMMUNOREGULATORY M2 PHENOTYPE International conference

    Furuhashi, Kazuhiro, Tsuboi, Naotake, Shimizu, Asuka, Kim, Hangsoo, Katsuno, Takayuki, Saka, Yosuke, Maruyama, Shoichi

    International Society for Stem Cell Research 10th Annual Meeting 

     More details

    Event date: 2012.6

    Language:English   Presentation type:Poster presentation  

    Country:Greece  

  7. Low Serum Cultured Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells Ameliorate Crescentic Glomerulonephritis by Functional Polarization of Macrophages into Immunoregulatory M2 Phenotype International conference

    Kazuhiro Furuhashi, Naotake Tsuboi, Asuka Shimizu, Yiqin Shi, Hangsoo Kim, Takayuki Katsuno, Yosuke Saka, Takenori Ozaki, Waichi Sato, Enyu Imai, Seiichi Matsuo, Shoichi Maruyama

    The Asia Pacifific Meeting of Vasculitis and ANCA Workshop 2012 

     More details

    Event date: 2012.3

    Language:English   Presentation type:Oral presentation (general)  

    Country:Japan  

  8. Low serum cultured adipose-derived mesenchymal stromal cells, but not bone-marrow derived mesenchymal stem cells, ameliorate rat crescentic glomerulonephritis by functional polarization of macrophages into immunoregulatory M2 phenotype International conference

    Kazuhiro Furuhashi, Naotake Tsuboi, Seiichi Matsuo, and Shoichi Maruyama

    5th International Conference on Autoimmunity: Mechanisms and Novel Treatments 

     More details

    Event date: 2011.9

    Language:English   Presentation type:Poster presentation  

    Country:Japan  

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Research Project for Joint Research, Competitive Funding, etc. 2

  1. 生体がもつ巧妙な炎症制御機構の解明から治療応用へ

    2021.4 - 2028.3

    国立研究開発法人科学技術振興機構(JST)  創発的研究支援事業 

    古橋和拡

      More details

    Authorship:Principal investigator  Grant type:Competitive

  2. 間葉系幹細胞治療用中空糸膜カラムの開発

    2021.4 - 2024.3

    AMED: 国立研究開発法人日本医療研究開発機構  再生医療実現拠点ネットワークプログラム(技術開発個別課題) 

    古橋和拡

      More details

    Authorship:Principal investigator  Grant type:Competitive

KAKENHI (Grants-in-Aid for Scientific Research) 9

  1. 生体がもつ巧妙な炎症制御機構の解明から治療応用へ

    2021.4 - 2028.3

    国立研究開発法人科学技術振興機構(JST)  創発的研究支援事 

    古橋和拡

      More details

    Authorship:Principal investigator  Grant type:Competitive

  2. 間葉系幹細胞の微小環境での炎症制御機構に着眼した次世代型免疫・炎症制御法の創成

    Grant number:21H04824  2021.4 - 2024.3

    科学研究費助成事業  基盤研究(A)

    丸山 彰一, 古橋 和拡, 杉浦 悠毅, 平山 明由, 榎本 篤, 田中 章仁, 石本 卓嗣, 秋山 真一

      More details

    Authorship:Coinvestigator(s) 

    既存の免疫抑制薬は過剰免疫抑制による感染症などの副作用が問題となっている。間葉系幹細胞(MSC)は、障害部位の炎症強度に応じた自律的かつ局所での炎症制御が可能なことから、次世代の免疫制御療法として期待されている。しかし、その作用機序は十分解明されておらず、その実用化に際しては課題が多い。新概念として『障害部位に到達したMSC由来細胞外小胞が炎症細胞から放出される炎症性物質と微小空間で会合した時にのみ免疫抑制物質が生成されて局所での抗炎症作用が出現する』という着想に至った。本研究では、この新概念を検証して、効果的で安全な次世代型免疫・炎症制御療法の開発に取り組む。

  3. フルクトース代謝を標的とした糖尿病性腎臓病の病態解明と新規治療法の開発

    Grant number:21K08254  2021.4 - 2024.3

    科学研究費助成事業  基盤研究(C)

    石本 卓嗣, 小杉 智規, 古橋 和拡, 平山 明由

      More details

    Authorship:Coinvestigator(s) 

    これまでに、グルコースより内因性に産生される過剰なフルクトース代謝が糖尿病性腎臓病(DKD)およびメタボリック症候群・脂肪肝を進展させることを報告し、フルクトース代謝酵素KHK-Cを抑制する治療法の開発に取り組んできた。本研究は、①腎尿細管のKHK-C依存的フルクトース代謝の抑制によるDKDの進展抑制効果およびその機序を解明し、②高い酵素耐性を持つ非環状型人工核酸を用いたKHK-Cを阻害する核酸医薬を開発する。

  4. ヒトiPS細胞由来間葉系幹細胞を用いた新規腎疾患治療法の開発

    Grant number:21K08253  2021.4 - 2024.3

    科学研究費助成事業  基盤研究(C)

    田中 章仁, 石本 卓嗣, 丸山 彰一, 古橋 和拡

      More details

    Authorship:Coinvestigator(s) 

    間葉系幹細胞(MSC)は様々な疾患に対する治療効果が示されている。しかし、MSCは品質のばらつきがあるため、治療効果の担保が大きな問題となっている。本課題では、iPS細胞からMSCを分化誘導し、腎炎に対する治療効果が安定して高いことを確認し、MSCの欠点を克服する。さらに治療効果を高める操作を加え、これまでのMSCよりも、腎炎に対して各段に高い治療効果を得る。最終的には、既存の治療法を凌駕する、難治性腎疾患に対する全く新しい細胞治療を確立する。

  5. 特異的な間葉系幹細胞マーカーMeflinを介した腎線維化の機序解明と治療法の開発

    Grant number:20K08589  2020.4 - 2023.3

    科学研究費助成事業  基盤研究(C)

    齋藤 尚二, 丸山 彰一, 古橋 和拡, 榎本 篤

      More details

    Authorship:Coinvestigator(s) 

    1)Meflinの正常腎ならびに疾患モデルマウスにおける発現を正常マウスならびにMeflinノックアウトマウスを用いて解析する
    2)Meflin陽性細胞の腎線維化に関する役割をMeflin-CreERT2;Rosa26-LSL-tdtomatoマウスを用いて経時的・空間的に系譜追跡し解明する
    3)Meflin-ZsGreen-DTR-Creマウスを用いてMeflin陽性細胞を消去し、その役割を解明する
    4)Meflinの発現を誘導することにより、腎線維化進展や臓器不全の予防につながる治療法を開発する
    当初の予定として、以下を計画していた。1)Meflinの正常腎ならびに疾患モデルマウスにおける発現を正常マウスならびにMeflinノックアウトマウスを用いて解析する。2)Meflin陽性細胞の腎線維化に関する役割をMeflin-CreERT2;Rosa26-LSL-tdtomatoマウスを用いて経時的・空間的に系譜追跡し解明する。3)Meflin-ZsGreen-DTR-Creマウスを用いてMeflin陽性細胞を消去し、その役割を解明する。4)Meflinの発現を誘導することにより、腎線維化進展や臓器不全の予防につながる治療法を開発する。
    これらの計画のうち、主に1)と2)について主に実験を進めた。既に腎臓におけるMeflinの発現の検討を行っており、正常腎においてはMeflinが腎間質の他にも糸球体門部や一部血管壁に分布していることを確認している。更にマウスに腎線維化を誘導すると、線維化部位に一致してMeflinの発現が増強することを確認している。更には糸球体門部付近においてMeflinとReninが一部共発現することが確認された。Meflin陽性細胞にはReninを産生する可能性が示された。
    Meflin-CreERT2;Rosa26-LSL-tdtomatoマウスにタモキシフェンを投与することにより、Meflin陽性細胞を赤く光らせることができ、Meflinの細胞系譜を特異的に追跡することができるようになった。このマウスを用いて解析を進めたところ、改めてMeflin陽性細胞が間質ならびに糸球体門部やその近辺の血管壁な局在する事が確認できた。このマウスに腎線維化を誘導したところ、線維化マウスにMeflin陽性細胞が増える事も確認できた。
    Meflinノックアウトマウス、Meflin-CreERT2;Rosa26-LSL-tdtomatoマウス、Meflin-ZsGreen-DTR-Creマウスを用いた解析を予定している。これらのうち、主にMeflin-CreERT2;Rosa26-LSL-tdtomatoマウスを用いた解析が進んでいる。
    引き続きこれらの遺伝子改変マウスを用いて、更なるMeflinの発現や動態を明らかにする予定であるが、遺伝子改変マウスの出生数が少なく、研究に必要な動物数を確保する事が困難であり、若干予想通り実験計画が進まなかった。
    当初の予定通り、引き続き以下のマウスの表現型の解析を行っていく。
    1)Meflinの正常腎ならびに疾患モデルマウスにおける発現を正常マウスならびにMeflinノックアウトマウスを用いて解析する。2)Meflin陽性細胞の腎線維化に関する役割をMeflin-CreERT2;Rosa26-LSL-tdtomatoマウスを用いて経時的・空間的に系譜追跡し解明する。3)Meflin-ZsGreen-DTR-Creマウスを用いてMeflin陽性細胞を消去し、その役割を解明する。
    <BR>
    更には最終的にはMeflinの発現を誘導することにより、腎線維化進展や臓器不全の予防につながる治療法を開発することが目的である

  6. Screening of humoral pathogenesis of idiopathic focal segmental glomerulosclerosis by proteinuria visualized transparent model animal

    Grant number:19K22618  2019.6 - 2022.3

    Grants-in-Aid for Scientific Research  Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)

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    Authorship:Coinvestigator(s) 

  7. 難治性腎疾患におけるCaMK4を介した新規ポドサイト特異的治療法の開発

    Grant number:19K08723  2019.4 - 2022.3

    科学研究費助成事業  基盤研究(C)

    前田 佳哉輔, 丸山 彰一, 古橋 和拡, 勝野 敬之, 小杉 智規, 加藤 規利

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    Authorship:Coinvestigator(s) 

    ポドサイトの機能不全は慢性腎臓病の進展に中心的な役割を担う。我々は、カルシウム/カルモジュリン依存性キナーゼIV(CaMK4)の活性化が、①ループス腎炎におけるポドサイト障害の原因の一つであること、②細胞骨格の制御を介したポドサイト障害と免疫複合体沈着・半月体形成に関与する知見を得た。
    また、本研究では難治性腎疾患(進行性半月体形成性腎炎、治療抵抗性ネフローゼ症候群)への治療応用を見据え、①ポドサイト内のCaMK4シグナルを介した半月体形成・糸球体硬化の分子機構の解明、②CaMK4をターゲットとした半月体形成性腎炎・難治性ネフローゼ症候群のポドサイト特異的新規治療法の開発をめざす。
    カルシウム/カルモジュリン依存性キナーゼ(CaMK)シグナルに対するポドサイト特異的治療の確立のため、難治性腎疾患の一つである、難治性ネフローゼ症候群におけるCaMKシグナルの解析を行った。難治性ネフローゼ症候群の一つであるヒト巣状分節性糸球体硬化症(FSGS)におけるポドサイト内のCaMK4とCaMK2の発現の違いから上流のCaMKキナーゼ(CaMKK)に着目した。CaMKKの2種類のアイソフォームの両者を阻害する低分子化合物(CaMKK阻害薬)を使用して、その役割を検討した。FSGSモデルマウスにCaMKK阻害薬を投与し、尿蛋白の推移を検討した。CaMK4阻害を行った場合と同様に蛋白尿の減少が予想されたが、CaMKKの阻害による蛋白尿の誘導に関してはコントロールと比較して有意な差は認められなかった。また、ヒト培養ポドサイトを使用した実験においては、CaMKK阻害薬投与により刺激剤によるアポトーシスがコントロールよりむしろ有意に増加した。そのため、CaMKK各アイソフォームの機能解析もすすめることとし、CaMKKα、CaMKKβ各欠損マウスから、各々の欠損マウスとCaMKKα/βダブルノックアウトマウスを作製した。CaMKKダブルノックアウトマウスにFSGSマウスモデルであるアドリアマイシン腎症を作製し、尿蛋白の推移を検討したが、阻害薬投与実験の結果と同様に蛋白尿の改善を認めなかった。
    ポドサイト内におけるCaMKK-CaMK4シグナル経路の機能解析のためCaMKK阻害実験を行ったが、当初CaMK4を活性化する役割をもつCaMKKは、同様にポドサイト障害を軽減すると想定されたが、予想に反し改善を認めなかった。そのため、CaMK4の機能解析のみならず、現在CaMKK各アイソフォームの欠損マウスを入手しそのアイソフォーム毎の機能解析を行っているためやや遅れる結果となっている。
    CaMKK各アイソフォームの欠損マウスを使用し、各々のポドサイト内における機能解析をすすめる。

  8. 間葉系幹細胞治療における現在の問題点を解決する新たな細胞治療用カラムの開発

    Grant number:19K08722  2019.4 - 2022.3

    科学研究費助成事業  基盤研究(C)

    古橋 和拡, 石本 卓嗣, 前田 佳哉輔, 丸山 彰一, 勝野 敬之

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    Authorship:Principal investigator 

    Grant amount:\4420000 ( Direct Cost: \3400000 、 Indirect Cost:\1020000 )

    間葉系幹細胞(MSC)を用いた臨床試験はこの数年で著しく増加している。しかし、MSCを静脈内投与された患者が肺塞栓のため死亡した事例が報告されており、さらなる安全な幹細胞療法の開発が急務である。本研究では、MSCがもつ優れた成長因子・免疫制御因子の産生能力に着目し、細胞を直接体内に投与せず、これらの液性因子を体内に投与できる治療法としてMSC治療用中空糸膜カラムを開発する。これにより細胞による肺塞栓をゼロにできる。その際に、MSCの静脈内投与と遜色ない治療効果をカラムによって得るためには、MSCの活性化が必要であり、MSCを活性化する全く新しい細胞カラムを開発する。

  9. マイクロRNAと脂肪幹細胞由来エクソソームを用いた、敗血症性AKI治療開発

    Grant number:19K08676  2019.4 - 2022.3

    科学研究費助成事業  基盤研究(C)

    加藤 規利, 前田 佳哉輔, 丸山 彰一, 古橋 和拡, 勝野 敬之

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    Authorship:Coinvestigator(s) 

    敗血症は、全世界的にみても死亡率が高い重篤な疾患である。また新たな治療法の開発は遅れ、生存率の改善は停滞している。我々はToll like receptorシグナルをmiRNAによって制御するといった、新しいアプローチによる治療を報告してきた。一方で幹細胞由来のエクソソームには、炎症性疾患における治療効果が報告されており、今回は低血清培地型脂肪由来幹細胞のエクソソームを用いて、我々が見つけ出したmiRNAを敗血症モデルマウスに投与して、治療効果の上乗せが可能かどうか、検証を行う。
    治療のプラットフォームとして従来の低分子化合物から、2000年代以降には新しく抗体医薬が多数開発され、関節リウマチや悪性新生物の分野で広く応用され患者の治療の仕組みが大きく変わって来たという事実がある。今後の新しい治療薬として、細胞治療に加え核酸医薬が挙げられている。核酸医薬は比較的安価に合成でき、一度定めた投与法を用い、配列の変更などを行うことで、様々な疾患に応用可能な治療薬として注目を集めている。我々も生体内に存在する自然のRNAi機構であるmicroRNA(miRNA)の治療的応用に着目し、過去においてPolyethylenimine (PEI)をドラッグデリバリーシステムとして用い、NF-κBを負に制御するmiR-146aを投与することで、敗血症モデルマウスの高サイトカイン血症を抑制、生存率を改善させる事に成功してきた。miR-146aに治療効果があることがわかった一方で、敗血症治療のターゲットの一つとして脾臓が重要な役割を持つことが判明した。
    次に投与法としてPEIを全身投与という形で用いた核酸のデリバリーを行ってきたが、PEI自体に免疫賦活化作用があることから、PEIだから有効性が確認されたのか、他のデリバリーシステムがより有益なのかの検証が必要である。背景として炎症部位にはリポソームが適しているという報告は多数ある。また昨今では細胞外小胞であるエクソソームもドラッグデリバリーに優れているという報告も相次いでいる。
    今回は核酸のデリバリー方法として、PEI、リポソーム、エクソソームを用い、投与方法としても全身投与、ターゲット臓器としての脾臓直接投与を行うことで、敗血症に対する治療効果を検証する。
    我々の先行研究においては、NF-κBの下流シグナルを抑制するmiR-146aの発現ベクターを用いてきた。昨今ゾルゲンスマといった遺伝子導入治療が臨床に応用されるようになり、治療法のプラットフォームとしてベクターを用いることは容認されるが、敗血症モデルは急性疾患であり、目的細胞(この場合脾臓マクロファージ)に取り込まれ、効果を発揮させるためにモデル作成前に投与する必要があった。
    以上のような背景から、臨床的にも応用できるよう即効性を持たせるため、今回は治療物質としてmiR-146a発現ベクターではなく、mature miR-146aを用いることとした。また投与経路を経静脈的全身投与、および効果臓器としての脾臓直接投与を行った。脾臓直接投与に関しては、先行実験を参照にPEIをデリバリーシステムとして利用し投与したmiRNAの大部分が脾臓に留まり、一部門脈を介してと考えられる肝臓にも確認された。また同様に先行研究で明らかになったmiR-146aの脾臓マクロファージへの取り込みに関しても、F4/80による脾臓細胞のセレクションにより証明した。盲腸結紮穿孔(CLP)モデルにおいてBUN, Cr, LDHといった臓器障害のパラメーターはscramble配列と比較しても改善傾向をみたが、non-treatと比較すると核酸投与自体が障害を助長しており、治療的介入により十分な改善効果が確認できなかった。次に脂質二重膜を形成するリポソームを用いてmature miR-146aを経腹膜投与、経静脈的に投与し治療効果を評価した。現在までのところで、両投与経路で評価した限りにおいて、死亡率に関し優位な治療効果を示せていない。
    マウス盲腸結紮穿孔モデルは、盲腸穿孔による細菌感染、腹腔内局所への炎症細胞浸潤、リンパ節における抗原提示、全身のサイトカインストームといった一連の敗血症の経過を模すことができ、実際の臨床状況に即した反応が得られるメリットがあるが、もとより手技的なバラツキが大きなモデルであり、以前の我々の報告の際と術者が変わったこともあり安定的な障害を起こせていない実情がある。そのため敗血症モデルを、より安定的なLPS腹腔内注射モデルに変更して治療実験を継続する。
    投与経路に関しては、直接的な脾臓内投与に特徴を見出していたが、治療効果は一部に認めるものの物理的な侵襲が高く、応用にはハードルがある。以上により(1)mature miR-146a+PEI, (2)mature miR-146a+リポソーム, (3)人工核酸miR-146a+PEI, (4)人工核酸miR-146a+リポソームの各群で頚静脈投与を行い、治療効果を確認する。特に後者の人工核酸に関しては生体内での安定性が高く、より強い効果があると言われる。実際にin vitroの系において、一部マウスマクロファージ細胞株に対しLPS刺激を行った際の、IL6等炎症性サイトカイン反応を、天然核酸より強く抑制したというデータが得られている。投与タイミングにおいても、早期に投与すると腹腔内の感染、菌血症に対する炎症の初期反応が抑制されてしまう可能性があり、いままでモデル作成直後に投与してきたが、12時間もしくは24時間投与をずらすことで、晩期の過剰な免疫応答を抑える事を期待して条件ふりをしていく。

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Industrial property rights 3

  1. 尿細管間質障害の検出用バイオマーカー並びにその用途

    古橋和拡・丸山彰一・田中章仁・澤由里子・LSIメディエンス

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    Application no:特願2021-108341  Date applied:2021

  2. 脂肪由来間葉系幹細胞ADR-001による腎疾患治療法の開発

    古橋和拡

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    Application no:特願2020- 71737  Date applied:2020.4

    Rights holder:古橋和拡・丸山彰一・田中章仁・唐澤宗稔・ロート株式会社

  3. IMMUNOSUPPRESSING AGENT COMPRISING MESENCHYMAL STEM CELL DERIVED FROM ADIPOSE TISSUE, AND USE THEREOF

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    Application no:PCT/JP2010/064682  Date applied:2010.8

    Date announced:2011.4

    Country of applicant:Domestic  

 

Teaching Experience (On-campus) 2

  1. 腎臓内科

    2021

  2. 腎臓内科

    2020