Organization
Nagoya University Hospital Orthopedics Lecturer of hospital
Title
Lecturer of hospital
MATSUSHITA Masaki
Degree 1
-
博士（医学） （ 2014.3 名古屋大学 ）
Current Research Project and SDGs 1
-
ドッラグ・リポジショニングによる軟骨無形成症治療薬の開発研究
Research History 5
-
Nagoya University Nagoya University Hospital Orthopedics Lecturer of hospital
2021.7
-
名古屋大学附属病院整形外科医員
2013.4 - 2014.3
Country：Japan
-
あいち小児保健医療総合センター整形外科
2010.4 - 2011.4
Country：Japan
-
社会保険中京病院整形外科
2004.4 - 2010.3
Country：Japan
-
社会保険中京病院嘱託研修医
2002.5 - 2004.3
Country：Japan
Education 2
-
Nagoya University Graduate School, Division of Medical Sciences
2010.4 - 2014.3
Country： Japan
-
Nagoya University Faculty of Medicine
1996.4 - 2002.3
Country： Japan
Professional Memberships 5
-
日本整形外科学会
-
日本小児整形外科学会
-
中部日本整形外科災害外科学会
-
日本骨代謝学会
-
日本軟骨代謝学会
Awards 3
-
第21回日本軟骨代謝学会賞
2016 日本軟骨代謝学会
-
Basic Science Award Paper of Pediatric Orthopaedic Society of North America (POSNA) Annual Meeting 2015
2015 Pediatric Orthopaedic Society of North America (POSNA)
-
New Investigator Award of 7th International Conference on Children Bone health (ICCBH) 2015
2015 International Conference on Children Bone health (ICCBH)
Papers 66
-
Phase 1b study on the repurposing of meclizine hydrochloride for children with achondroplasia
Matsushita, M; Kitoh, H; Mishima, K; Kamiya, Y; Kato, D; Takemoto, G; Sawamura, K; Ueno, S; Yasuhiro, N; Nishida, K; Imagama, S
PLOS ONE Vol. 18 ( 7 ) page： e0283425 2023.7
-
Mishima, K; Kamiya, Y; Matsushita, M; Imagama, S
JOURNAL OF CHILDRENS ORTHOPAEDICS Vol. 17 ( 3 ) page： 197 - 204 2023.6
-
Kawashima, I; Matsushita, M; Mishima, K; Kamiya, Y; Osawa, Y; Ohkawara, B; Ohno, K; Kitoh, H; Imagama, S
BMC MUSCULOSKELETAL DISORDERS Vol. 24 ( 1 ) page： 200 2023.3
-
Guided growth for coronal lower limb deformities in skeletal dysplasia
Kitoh, H; Kamiya, Y; Mishima, K; Matsushita, M; Kaneko, H; Kitamura, A; Sawamura, K; Matsuyama, S
JOURNAL OF PEDIATRIC ORTHOPAEDICS-PART B Vol. 32 ( 2 ) page： 157 - 164 2023.3
-
Kamiya, Y; Mishima, K; Tanaka, T; Sawamura, K; Matsushita, M; Imagama, S
MEDICINE Vol. 102 ( 7 ) page： e33012 2023.2
-
Kamiya, Y; Matsushita, M; Mishima, K; Ohkawara, B; Michigami, T; Imagama, S; Ohno, K; Kitoh, H
EXPERIMENTAL AND THERAPEUTIC MEDICINE Vol. 25 ( 1 ) page： 39 2023.1
-
Gain-of-Function of FGFR3 Accelerates Bone Repair Following Ischemic Osteonecrosis in Juvenile Mice
Kato, D; Matsushita, M; Takegami, Y; Mishima, K; Kamiya, N; Osawa, Y; Imagama, S; Kitoh, H
CALCIFIED TISSUE INTERNATIONAL Vol. 111 ( 6 ) page： 622 - 633 2022.12
-
A cross-sectional nationwide survey of osteosclerotic skeletal dysplasias in Japan
Sawamura, K; Mishima, K; Matsushita, M; Kamiya, Y; Kitoh, H
JOURNAL OF ORTHOPAEDIC SCIENCE Vol. 27 ( 5 ) page： 1139 - 1142 2022.9
-
Comparison of clinical outcomes, including the wound healing rate, between inframalleolar bypass to the pedal artery and that to the pedal branch artery in the modern endovascular era
Kodama Akio, Kobayashi Taira, Guntani Atsushi, Yamada Tetsuya, Koyama Akio, Mii Shinsuke, Ishibashi Hiroyuki, Matsushita Masahiro, Komori Kimihiro
JOURNAL OF VASCULAR SURGERY Vol. 75 ( 6 ) page： 2019 - + 2022.6
-
Mishima, K; Kamiya, Y; Matsushita, M; Imagama, S; Kitoh, H
JOURNAL OF PEDIATRIC ORTHOPAEDICS Vol. 42 ( 5 ) page： 239 - 245 2022.5
-
Mishima, K; Kamiya, Y; Matsushita, M; Imagama, S; Kitoh, H
MEDICINE Vol. 101 ( 11 ) 2022.3
-
Disease-specific complications and multidisciplinary interventions in achondroplasia
Kitoh, H; Matsushita, M; Mishima, K; Kamiya, Y; Sawamura, K
JOURNAL OF BONE AND MINERAL METABOLISM Vol. 40 ( 2 ) page： 189 - 195 2022.3
-
Meclozine ameliorates skeletal muscle pathology and increases muscle forces in<i> mdx</i> mice
Kawamura, Y; Hida, T; Ohkawara, B; Matsushita, M; Kobayashi, T; Ishizuka, S; Hiraiwa, H; Tanaka, S; Tsushima, M; Nakashima, H; Ito, K; Imagama, S; Ito, M; Masuda, A; Ishiguro, N; Ohno, K
BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS Vol. 592 page： 87 - 92 2022.2
-
Takemoto, G; Matsushita, M; Okamoto, T; Ito, T; Matsuura, Y; Takashima, C; Chen-Yoshikawa, TF; Ebi, H; Imagama, S; Kitoh, H; Ohno, K; Hosono, Y
FRONTIERS IN CELL AND DEVELOPMENTAL BIOLOGY Vol. 9 page： 694018 2022.1
-
Inconvenience and adaptation in Japanese adult achondroplasia and hypochondroplasia: A cross-sectional study
Ajimi Akiko, Matsushita Masaki, Mishima Kenichi, Haga Nobuhiko, Fujiwara Sayaka, Ozono Keiichi, Kubota Takuo, Kitaoka Taichi, Imagama Shiro, Kitoh Hiroshi
CLINICAL PEDIATRIC ENDOCRINOLOGY Vol. 31 ( 1 ) page： 18 - 24 2022.1
-
Inconvenience and adaptation in Japanese adult achondroplasia and hypochondroplasia: A cross-sectional study.
Ajimi A, Matsushita M, Mishima K, Haga N, Fujiwara S, Ozono K, Kubota T, Kitaoka T, Imagama S, Kitoh H
Clinical pediatric endocrinology : case reports and clinical investigations : official journal of the Japanese Society for Pediatric Endocrinology Vol. 31 ( 1 ) page： 18 - 24 2022
-
Matsushita, M; Mishima, K; Nagata, T; Kamiya, Y; Imagama, S; Kitoh, H
CLINICAL PEDIATRIC ENDOCRINOLOGY Vol. 30 ( 1 ) page： 53 - 56 2021.1
-
Health-related Quality of Life in Adult Patients with Multiple Epiphyseal Dysplasia and Spondyloepiphyseal Dysplasia.
Matsushita M, Mishima K, Kamiya Y, Haga N, Fujiwara S, Ozono K, Kubota T, Kitaoka T, Imagama S, Kitoh H
Progress in rehabilitation medicine Vol. 6 page： 20210048 2021
-
Effect of periosteal resection on longitudinal bone growth in a mouse model of achondroplasia
Kaneko, S; Matsushita, M; Mishima, K; Takegami, Y; Imagama, S; Kitoh, H
BONE REPORTS Vol. 13 page： 100708 2020.12
-
Mishima, K; Fujita, A; Mizuno, S; Matsushita, M; Nagata, T; Kamiya, Y; Miyake, N; Matsumoto, N; Imagama, S; Kitoh, H
CLINICAL CASE REPORTS Vol. 8 ( 12 ) page： 3109 - 3114 2020.12
-
Kaneko, H; Kitoh, H; Mishima, K; Matsushita, M; Hattori, T; Noritake, K; Ishiguro, N; Yoshihashi, Y
JOURNAL OF PEDIATRIC ORTHOPAEDICS-PART B Vol. 29 ( 6 ) page： 542 - 549 2020.11
-
A retrospective comparative study of corrective osteotomy for tibial deformities with the multiaxial correction fixator and the circular fixator.
Matsushita M, Kitoh H, Mishima K, Nagata T, Kamiya Y, Kaneko H, Hattori T, Ishiguro N
Journal of clinical orthopaedics and trauma Vol. 11 ( Suppl 4 ) page： S621 - S625 2020.7
-
Lower limb pain following allogeneic hematopoietic stem cell transplantation in Japanese children
Mishima, K; Kitoh, H; Matsushita, M; Nagata, T; Kamiya, Y; Takahashi, Y; Ishiguro, N
JOURNAL OF ORTHOPAEDIC SCIENCE Vol. 25 ( 4 ) page： 682 - 687 2020.7
-
Kitoh, H; Matsushita, M; Mishima, K; Nagata, T; Kamiya, Y; Ueda, K; Kuwatsuka, Y; Morikawa, H; Nakai, Y; Ishiguro, N
PLOS ONE Vol. 15 ( 4 ) page： e0229639 2020.4
-
Nagata, T; Matsushita, M; Mishima, K; Kamiya, Y; Kato, K; Toyama, M; Ogi, T; Ishiguro, N; Kitoh, H
MOLECULAR GENETICS & GENOMIC MEDICINE Vol. 8 ( 3 ) page： e1148 2020.3
-
Matsushita, M; Mishima, K; Yamashita, S; Haga, N; Fujiwara, S; Ozono, K; Kubota, T; Kitaoka, T; Ishiguro, N; Kitoh, H
JOURNAL OF BONE AND MINERAL METABOLISM Vol. 38 ( 1 ) page： 109 - 116 2020.1
-
Physical, Mental, and Social Problems of Adolescent and Adult Patients with Achondroplasia
Matsushita, M; Kitoh, H; Mishima, K; Yamashita, S; Haga, N; Fujiwara, S; Ozono, K; Kubota, T; Kitaoka, T; Ishiguro, N
CALCIFIED TISSUE INTERNATIONAL Vol. 104 ( 4 ) page： 364 - 372 2019.4
-
Mishima K, Kitoh H, Matsushita M, Sugiura H, Hasegawa S, Kitamura A, Nishida Y, Ishiguro N
Foot and ankle surgery : official journal of the European Society of Foot and Ankle Surgeons Vol. 24 ( 6 ) page： 509 - 513 2018.12
-
Kadono Izumi, Kitoh Hiroshi, Mishima Kenichi, Matsushita Masaki, Sato Koji, Kako Masato, Ishiguro Naoki
JOURNAL OF PEDIATRIC ORTHOPAEDICS-PART B Vol. 27 ( 6 ) page： 535 - 540 2018.11
-
A Mouse Distraction Osteogenesis Model
Fujio Masahito, Osawa Yusuke, Matsushita Masaki, Ogisu Kota, Tsuchiya Shuhei, Kitoh Hiroshi, Hibi Hideharu
JOVE-JOURNAL OF VISUALIZED EXPERIMENTS ( 141 ) 2018.11
-
Long term health-related quality of life in patients with achondroplasia and hypochondroplasia
Matsushita, M; Kitoh, H; Mishima, K; Ishiguro, N; Fujiwara, S; Haga, N; Kitaoka, T; Kubota, T; Ozono, K
JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH Vol. 33 page： 300 - 301 2018.11
-
Okura T, Matsushita M, Mishima K, Esaki R, Seki T, Ishiguro N, Kitoh H
Journal of orthopaedic research : official publication of the Orthopaedic Research Society Vol. 36 ( 1 ) page： 300 - 308 2018.1
-
Chronic lateral epiphyseal separation of the proximal tibia causes late-onset tibia vara.
Hasegawa S, Kitoh H, Matsushita M, Mishima K, Kadono I, Sugiura H, Kitamura A, Ishiguro N
Journal of pediatric orthopedics. Part B Vol. 27 ( 1 ) page： 31 - 34 2018.1
-
A Novel Heterozygous Mutation in the T-box Protein 4 Gene in an Adult Case of Small Patella Syndrome.
Oda T, Matsushita M, Ono Y, Kitoh H, Sakai T
Journal of orthopaedic case reports Vol. 8 ( 1 ) page： 85 - 88 2018.1
-
Extensive Bone Lengthening for a Patient with Linear Morphea.
Mishima K, Kitoh H, Matsushita M, Nagata T, Kamiya Y, Ishiguro N
Case reports in orthopedics Vol. 2018 page： 4535804 2018
-
Osawa Yusuke, Matsushita Masaki, Hasegawa Sachi, Esaki Ryusaku, Fujio Masahito, Ohkawara Bisei, Ishiguro Naoki, Ohno Kinji, Kitoh Hiroshi
BONE Vol. 105 page： 42 - 49 2017.12
-
Okura, T; Matsushita, M; Mishima, K; Seki, T; Ishiguro, N; Kitoh, H
JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH Vol. 32 page： S201 - S201 2017.12
-
Matsushita Masaki, Esaki Ryusaku, Mishima Kenichi, Ishiguro Naoki, Ohno Kinji, Kitoh Hiroshi
SCIENTIFIC REPORTS Vol. 7 ( 1 ) page： 7371 2017.8
-
Matsushita Masaki, Mishima Kenichi, Iwata Kohji, Hattori Tadashi, Ishiguro Naoki, Kitoh Hiroshi
MEDICINE Vol. 96 ( 19 ) page： e6662 2017.5
-
Kohno Yusuke, Nakashima Yasuharu, Kitano Toshio, Irie Taichi, Kita Atsushi, Nakamura Tomoyuki, Endo Hirosuke, Fujii Yosuke, Kuroda Takayuki, Mitani Shigeru, Kitoh Hiroshi, Matsushita Masaki, Hattori Tadashi, Iwata Koji, Iwamoto Yukihide
JOURNAL OF ORTHOPAEDIC SCIENCE Vol. 22 ( 1 ) page： 112 - 115 2017.1
-
Matsushita Masaki, Mishima Kenichi, Esaki Ryusaku, Ishiguro Naoki, Ohno Kinji, Kitoh Hiroshi
JOURNAL OF NEUROSURGERY-PEDIATRICS Vol. 19 ( 1 ) page： 91 - 95 2017.1
-
Maternal administration of meclozine for the treatment of foramen magnum stenosis in transgenic mice with achondroplasia
Matsushita M, Mishima K, Esaki R, Ishiguro N, Ohno K, Kitoh H
J Neurosurg Pediatr Vol. 19 page： 91-95 2017
-
[Risk factors for rebleeding and risk-based follow-up of obscure gastrointestinal bleeding after its initial diagnosis].
Uchida G, Nakamura M, Watanabe O, Yamamura T, Matsushita M, Ishikawa T, Furukawa K, Funasaka K, Ohno E, Kawashima H, Miyahara R, Goto H, Hirooka Y
Nihon Shokakibyo Gakkai zasshi = The Japanese journal of gastro-enterology Vol. 114 ( 10 ) page： 1819 - 1829 2017
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Clinical Results and Complications of Lower Limb Lengthening for Fibular Hemimelia: A Report of Eight Cases. Invited Reviewed
Mishima K, Kitoh H, Iwata K, Matsushita M, Nishida Y, Hattori T, Ishiguro N
Medicine (Baltimore) Vol. 95 ( 21 ) page： e3787 2016.5
-
Tranilast stimulates endochondral ossification by upregulating SOX9 and RUNX2 promoters Invited Reviewed
Hasegawa S, Kitoh H, Ohkawara B, Mishima K, Matsushita M, Masuda A, Ishiguro N, Ohno K
Biochem Biophys Res Commun Vol. 470 ( 2 ) page： 356 - 361 2016.2
-
Characterisation of novel RUNX2 mutation with alanine tract expansion from Japanese cleidocranial dysplasia patient Invited Reviewed
Shibata A, Machida J, Yamaguchi S, Kimura M, Tatematsu T, Miyachi H, Matsushita M, Kitoh H, Ishiguro N, Nakayama A, Higashi Y, Shimozato K, Tokita Y
Mutagenesis Vol. 31 ( 1 ) page： 61 - 67 2016.1
-
Low bone mineral density in achondroplasia and hypochondroplasia Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Mishima K, Kadono I, Sugiura H, Hasegawa S, Nishida Y, Ishiguro N
Pediatr Int page： 10.1111/ped.12890 2016
-
Prediction of Clinically Significant Leg-Length Discrepancy in Congenital Disorders Invited Reviewed
Mishima K, Kitoh H, Kadono I, Matsushita M, Sugiura H, Hasegawa S, Kitamura A, Nishida Y, Ishiguro N
Orthopedics Vol. 38 ( 10 ) page： e919 - e924 2015.10
-
Meclozine promotes lomgitudinal skeletal growth in transgenic mice with achondroplasia carrying a gain-of-function mutation in the FGFR3 gene Reviewed
Matsushita M, Hasegawa S, Kitoh H, Mori K, Ohkawara B, Yasoda A, Masuda A, Ishiguro N, Ohno K
Endocrinology Vol. 156 page： 548-554 2015
-
A glutamine repeat variant of the RUNX2 gene causes cleidocranial dysplasia Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Subasioglu A, Colak FK, Dundar M, Mishima K, Nishida Y, Ishiguro N
Mol Syndromol page： in press 2015
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Factors associated with an unfavourable outcome after Salter innominate osteotomy in patients with unilateral developmental dysplasia of the hip: Does occult dysplasia of the contralateral hip affect the outcome? Invited Reviewed
Kaneko H, Kitoh H, Mishima K, Matsushita M, Kadono I, Ishiguro N, Hattori T
Bone Joint J Vol. 96-B ( 10 ) page： 1419 - 1423 2014.10
-
Early and late fracture following extensive limb lengthening in achondroplasia and hypochondroplasia Invited Reviewed
Kitoh H, Kaneko H, Mishima K, Matsushita M, Kadono I, Nishida Y, Ishiguro N
Bone Joint J Vol. 96-B ( 9 ) page： 1269 - 1273 2014.9
-
Radiographic characteristics of the hand and cervical spine in fibrodysplasia ossificans progressiva Invited Reviewed
Mishima K, Kitoh H, Haga N, Nakashima Y, Kamizono J, Katagiri T, Susami T, Matsushita M, Ishiguro N
Intractable Rare Dis Res Vol. 3 ( 2 ) page： 46 - 51 2014.5
-
A case of severe proximal focal femoral deficiency with overlapping phenotypes of Al-Awadi-Raas-Rothschild syndrome and Fuhrmann syndrome Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Mishima K, Nishida Y, Ishiguro N
Ped Radiol Vol. 44 page： 1617-1619 2014
-
Benign prenatal hypophosphatasia: a treatable disease not to be missed Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Michigami T, Tachikawa K, Kaneko H, Mishima K, Ishiguro N
Ped Radiol Vol. 44 page： 340-343 2014
-
A novel in-flame deletion of the RUNX2 gene causes a classic form of cleidocranial dysplasia Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Kaneko H, Mishima K, Itoh Y, Tokita Y, Ishiguro N
J Bone Miner Metab Vol. 32 page： 96-99 2014
-
A comparative study of blade plate fixation and external fixation in osteotomies for slipped capital femoral epiphysis Invited Reviewed
Kitoh H, Kitakoji T, Hattori T, Kaneko H, Mishima K, Matsushita M, Ishiguro N
J Pediatr Orthop B Vol. 22 ( 6 ) page： 542 - 547 2013.11
-
Perhexiline maleate in the treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva: an open-labeled clinical trial Invited Reviewed
Kitoh H, Achiwa M, Kaneko H, Mishima K, Matsushita M, Kadono I, Horowitz JD, Sallustio BC, Ohno K, Ishiguro N
Orphanet J Rare Dis Vol. 8 page： 163 2013.10
-
Long-term outcome of gradual reduction using overhead traction for developmental dysplasia of the hip over 6 months of age Invited Reviewed
Kaneko H, Kitoh H, Mishima K, Matsushita M, Ishiguro N
J Pediatr Orthop Vol. 33 ( 6 ) page： 628 - 634 2013.9
-
Prognostic factors for trochanteric overgrowth after containment treatment in Legg-Calvé-Perthes disease Invited Reviewed
Kitoh H, Kaneko H, Mishima K, Matsushita M, Ishiguro N
J Pediatr Orthop B Vol. 22 ( 5 ) page： 432 - 436 2013.9
-
Clinically applicable antianginal agents suppress osteoblastic transformation of myogenic cells and heterotopic ossifications in mice Invited Reviewed
Yamamoto R, Matsushita M, Kitoh H, Masuda A, Ito M, Katagiri T, Kawai T, Ishiguro N, Ohno K
J Bone Miner Metab Vol. 31 ( 1 ) page： 26 - 33 2013.1
-
Orthopaedic manifestations and diagnostic clues in children with Guillain-Barré syndrome Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Itomi K, Kitakoji T, Iwata K, Mishima K, Ishiguro N, Hattori T
J Child Orthop Vol. 7 page： 177-182 2013
-
Meclozine facilitates chondrocyte proliferation and differentiation by attenuating abnormally activated fibroblast growth factor receptor 3 (FGFR3) signaling in achondroplasia Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Ohkawara B, Mishima K, Kaneko H, Ito M, Masuda A, Ishiguro N, Ohno K
PLoS One Vol. 8 page： e81569 2013
-
A novel SOX9 H169Q mutation in a family with overlapping phenotype of mild campomelic dysplasia and small patella syndrome Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Kaneko H, Mishima K, Kadono I, Ishiguro N, Nishmura G
Am J Med Genet A Vol. 161 page： 2528-2534 2013
-
Isolated bifid rib: clinical and radiological findings in children Invited Reviewed
Kaneko H, Kitoh H, Mabuchi A, Mishima K, Matsushita M, Ishiguro N
Pediatr Int Vol. 54 ( 6 ) page： 820 - 823 2012.12
-
Novel compound heterozygous mutations in the cathepsin K gene in Japanese female siblings with pyknodysostosis Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Kaneko H, Mishima K, Itoh Y, Hattori T, Ishiguro N
Mol Syndromol Vol. 2 page： 254-258 2012
Books 3
-
今日の整形外科治療指針第8版
松下雅樹（ Role： Contributor , FGFR3軟骨異形成症グループ）
医学書院 2021.10
-
整形・災害外科（特集：小児整形外科の最新知見）
松下雅樹、鬼頭浩史（ Role： Contributor , 軟骨無形成症に対する治療の現状と薬物療法の可能性）
金原出版株式会社 2019
-
雑誌「小児内科」増刊号：小児疾患の診断治療基準 改訂5版（第2部：疾患 XIX.運動器疾患）
松下雅樹（ Role： Contributor , 393.軟骨無形成症）
株式会社東京医学社 2018
MISC 20
-
Physical, Mental, and Social Problems of Adolescent and Adult Patients with Achondroplasia Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Mishima K, Yamashita S, Haga N, Fujiwara S, Ozono K, Kubota T, Kitaoka T, Ishiguro N
Calcified tissue international 2019.2
-
Extensive Bone Lengthening for a Patient with Linear Morphea. Reviewed
Mishima K, Kitoh H, Matsushita M, Nagata T, Kamiya Y, Ishiguro N
Case reports in orthopedics Vol. 2018 page： 4535804 2018
-
Clinical Results and Complications of Lower Limb Lengthening for Fibular Hemimelia: A Report of Eight Cases. Reviewed
Mishima K, Kitoh H, Iwata K, Matsushita M, Nishida Y, Hattori T, Ishiguro N
Medicine Vol. 95 ( 21 ) page： e3787 2016.5
-
Tranilast stimulates endochondral ossification by upregulating SOX9 and RUNX2 promoters. Reviewed
Hasegawa S, Kitoh H, Ohkawara B, Mishima K, Matsushita M, Masuda A, Ishiguro N, Ohno K
Biochemical and biophysical research communications Vol. 470 ( 2 ) page： 356-361 2016.2
-
Characterisation of novel RUNX2 mutation with alanine tract expansion from Japanese cleidocranial dysplasia patient. Reviewed
Shibata A, Machida J, Yamaguchi S, Kimura M, Tatematsu T, Miyachi H, Matsushita M, Kitoh H, Ishiguro N, Nakayama A, Higashi Y, Shimozato K, Tokita Y
Mutagenesis Vol. 31 ( 1 ) page： 61-7 2016.1
-
Prediction of Clinically Significant Leg-Length Discrepancy in Congenital Disorders. Reviewed
Mishima K, Kitoh H, Kadono I, Matsushita M, Sugiura H, Hasegawa S, Kitamura A, Nishida Y, Ishiguro N
Orthopedics Vol. 38 ( 10 ) page： e919-24 2015.10
-
Meclozine promotes longitudinal skeletal growth in transgenic mice with achondroplasia carrying a gain-of-function mutation in the FGFR3 gene. Reviewed
Matsushita M, Hasegawa S, Kitoh H, Mori K, Ohkawara B, Yasoda A, Masuda A, Ishiguro N, Ohno K
Endocrinology Vol. 156 ( 2 ) page： 548-54 2015.2
-
A case of severe proximal focal femoral deficiency with overlapping phenotypes of Al-Awadi-Raas-Rothschild syndrome and Fuhrmann syndrome. Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Mishima K, Nishida Y, Ishiguro N
Pediatric radiology Vol. 44 ( 12 ) page： 1617-9 2014.12
-
Radiographic characteristics of the hand and cervical spine in fibrodysplasia ossificans progressiva. Reviewed
Mishima K, Kitoh H, Haga N, Nakashima Y, Kamizono J, Katagiri T, Susami T, Matsushita M, Ishiguro N
Intractable & rare diseases research Vol. 3 ( 2 ) page： 46-51 2014.5
-
Benign prenatal hypophosphatasia: a treatable disease not to be missed. Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Michigami T, Tachikawa K, Ishiguro N
Pediatric radiology Vol. 44 ( 3 ) page： 340-3 2014.3
-
A novel in-frame deletion of the RUNX2 gene causes a classic form of cleidocranial dysplasia. Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Kaneko H, Mishima K, Itoh Y, Tokita Y, Ishiguro N
Journal of bone and mineral metabolism Vol. 32 ( 1 ) page： 96-9 2014.1
-
A comparative study of blade plate fixation and external fixation in osteotomies for slipped capital femoral epiphysis. Reviewed
Kitoh H, Kitakoji T, Hattori T, Kaneko H, Mishima K, Matsushita M, Ishiguro N
Journal of pediatric orthopedics. Part B Vol. 22 ( 6 ) page： 542-7 2013.11
-
Perhexiline maleate in the treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva: an open-labeled clinical trial. Reviewed
Kitoh H, Achiwa M, Kaneko H, Mishima K, Matsushita M, Kadono I, Horowitz JD, Sallustio BC, Ohno K, Ishiguro N
Orphanet journal of rare diseases Vol. 8 page： 163 2013.10
-
A novel SOX9 H169Q mutation in a family with overlapping phenotype of mild campomelic dysplasia and small patella syndrome. Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Kaneko H, Mishima K, Kadono I, Ishiguro N, Nishimura G
American journal of medical genetics. Part A Vol. 161A ( 10 ) page： 2528-34 2013.10
-
Long-term outcome of gradual reduction using overhead traction for developmental dysplasia of the hip over 6 months of age. Reviewed
Kaneko H, Kitoh H, Mishima K, Matsushita M, Ishiguro N
Journal of pediatric orthopedics Vol. 33 ( 6 ) page： 628-34 2013.9
-
Prognostic factors for trochanteric overgrowth after containment treatment in Legg-Calvé-Perthes disease. Reviewed
Vol. 22 ( 5 ) page： 432-6 2013.9
-
Orthopaedic manifestations and diagnostic clues in children with Guillain-Barré syndrome. Reviewed
Vol. 7 ( 3 ) page： 177-82 2013.6
-
Clinically applicable antianginal agents suppress osteoblastic transformation of myogenic cells and heterotopic ossifications in mice. Reviewed
Yamamoto R, Matsushita M, Kitoh H, Masuda A, Ito M, Katagiri T, Kawai T, Ishiguro N, Ohno K
Journal of bone and mineral metabolism Vol. 31 ( 1 ) page： 26-33 2013.1
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Meclozine facilitates proliferation and differentiation of chondrocytes by attenuating abnormally activated FGFR3 signaling in achondroplasia. Reviewed
Matsushita M, Kitoh H, Ohkawara B, Mishima K, Kaneko H, Ito M, Masuda A, Ishiguro N, Ohno K
PloS one Vol. 8 ( 12 ) page： e81569 2013
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Isolated bifid rib: clinical and radiological findings in children. Reviewed
Kaneko H, Kitoh H, Mabuchi A, Mishima K, Matsushita M, Ishiguro N
Pediatrics international : official journal of the Japan Pediatric Society Vol. 54 ( 6 ) page： 820-3 2012.12
Presentations 29
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7. Abnormal growth plate structure in mouse model of hypophosphatemic rickets is ameliorated by meclozine treatment International conference
Yasunari Kamiya, Masaki Matsushita, Kenichi Mishima, Bisei Ohkawara, Shiro Imagma, Kinji Ohno, Hiroshi Kitoh
Orthopaedic Research Society 2022 Annual Meeting
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Health-related quality of life in patients with multiple epiphyseal dysplasia and spondyloepiphyseal dysplasia International conference
Masaki Matsushita, Kenichi Mishima, Yasunari Kamiya, Nobuhiko Haga, Sayaka Fujiwara, Keiichi Ozono, Takuo Kubota, Taichi Kitaoka, Shiro Imagama, Hiroshi Kitoh
13th Combined Meeting of Asia Pacific Spine Society & Asia Pacific Paediatric Orthopaedic Society (APSS-APPOS 2021)
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Efficacy and tolerability of meclozine for the treatment of short stature in a mouse model of achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Kenichi Mishima, Tadashi Nagata, Yasunari Kamiya, Shiro Imagama, Kinji Ohno, Hiroshi Kitoh
2021 Annual Meeting - Orthopaedic Research Society (ORS)
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Periosteal resection promotes longitudinal bone growth via activating endochondral ossification in growing mouse model International conference
Shinya Kaneko, Masaki Matsushita, Kenichi Mishima, Hiroshi Kitoh, Naoki Ishiguro
2020 Annual Meeting - Orthopaedic Research Society (ORS)
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Efficacy of soluble lansoprazole-impregnated artificial bones for repairing cortical bone defects in rabbits International conference
Kenichi Mishima, Ryusaku Esaki, Masaki Matsushita, Naoki Ishiguro
2020 Annual Meeting - Orthopaedic Research Society (ORS)
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Local administration of meclozine promotes the longitudinal growth of selected bone in mouse model International conference
Tadashi Nagata, Masaki Matsushita, Kenichi Mishima, Yasunari Kamiya, Bisei Ohkawara, Kinji Ohno, Naoki Ishiguro, Hiroshi Kitoh
2020 Annual Meeting - Orthopaedic Research Society (ORS)
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Meclozine promotes bone growth and bone mineralization in mouse model of hypophosphatemic rickets International conference
Yasunari Kamiya, Masaki Matsushita, Kenichi Mishima, Tadashi Nagata, Naoki Ishiguro, Kinji Ono, Hiroshi Kitoh
2020 Annual Meeting - Orthopaedic Research Society (ORS)
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Drug repositioning for FGF23-mediated hypophosphatemia: Disulfiram lowers FGF23 production International conference
Kenichi Mishima, Hiroshi Sugiura, Ryusaku Esaki, Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Naoki Ishiguro, Kinji Ohno
2019 Annual Meeting - Orthopaedic Research Society (ORS)
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Long term health-related quality of life in patients with achondroplasia and hypochondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Kenichi Mishima, Naoki Ishiguro, Sayaka Fujiwara, Nobuhiko Haga, Taichi Kitaoka, Takuo Kubota, Keiichi Ozono
American Society for Bone and Mineral Research (ASBMR) 2018 Annual Meeting
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小児先天性疾患に合併した下腿変形に対するMAC創外固定器による矯正
松下雅樹、鬼頭浩史、三島健一、長田侃、金子浩史、岩田浩志、服部義、石黒直樹
第31回日本創外固定・骨延長学会 2018.8.4
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Bone formation was promoted in mouse model of distraction osteogenesis with gain-of-function mutation in FGFR3 International conference
Masaki Matsushita, Yusuke Ohsawa, Kenichi Mishima, Naoki Ishiguro, Kinji Ohno, Hiroshi Kitoh
Fibroblast Growth Factors in Development & Disease - Gordon Research Conference 2018
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Treatment of the lower limb deformities by a multi-axial external fixation system Invited International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Tadashi Hattori, Hiroshi Kaneko, Kenichi Mishima, Naoki Ishiguro
The 61st Korean Orthopaedic Association Annual Meeting
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Clinically Feasible Dose of Meclozine Improves Bone Growth, Bone Volume, and Bone Quality in Mouse Model with Achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Kenichi Mishima, Naoki Ishiguro, Kinji Ohno, Hiroshi Kitoh
The 27th Korean-Japanese Combined Orthopaedic Symposium (KJCOS) 2017
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Clinically feasible dose of meclozine promotes bone growth in mouse model with achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Kenichi Mishima, Hiroshi Sugiura, Sachi Hasegawa, Akiko Kitamura, Naoki Ishiguro, Kinji Ohno
2017 Annual Meeting - Orthopaedic Research Society (ORS)
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Long term health-related quality of life in achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Kenichi Mishima, Satoshi Yamashita, Hiroshi Sugiura, Akiko Kitamura, Naoki Ishiguro
Combined European Paediatric Orthopaedic Society and Pediatric Orthopaedic Society of North America (EPOSNA) 2017 Annual meeting
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Clinical feasibility of meclozine for improvement of short stature in achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Kenichi Mishima, Hiroshi Sugiura, Akiko Kitamura, Naoki Ishiguro
Combined European Paediatric Orthopaedic Society and Pediatric Orthopaedic Society of North America (EPOSNA) 2017 Annual meeting
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軟骨無形成症に対する根本的治療の開発
松下雅樹、鬼頭浩史、 三島健一、杉浦洋、長谷川幸、北村暁子、石黒直樹、大野欽司
第27回日本小児整形外科学会 2016.12.1
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Clinical feasibility of oral administration of meclozine for the treatment of short stature in achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Kenichi Mishima, Naoki Ishiguro, Kinji Ohno
American Society for Bone and Mineral Research (ASBMR) 2016 Annual Meeting
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Clinically attainable concentration of meclozine has a potent effect on promoting bone growth in achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Kenichi Mishima, Naoki Ishiguro, Kinji Ohno
Annual Meetings of the Endocrine Society of Australia and Society for Reproductive Biology and Australia and New Zealand Bone and Mineral Society 2016
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Clinically attainable concentration of meclozine promotes bone growth in transgenic mice with achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Kenichi Mishima, Naoki Ishiguro, Kinji Ohno
Fibroblast Growth Factors in Development & Disease - Gordon Research Conference 2016
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Radical therapeutic strategy for foramen magnum stenosis and spinal canal stenosis in achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Kenichi Mishima, Hiroshi Sugiura, Sachi Hasegawa, Akiko Kitamura, Naoki Ishiguro, Kinji Ohno
2016 Annual Meeting - Orthopaedic Research Society (ORS)
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軟骨無形成症治療の現在と未来 Invited
松下雅樹
Nordiscience Ach workshop 2015.11.21
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Meclozine has a potential effects on short stature and foramen magnum stenosis in transgenic mice with achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Kenichi Mishima, Hiroshi Sugiura, Sachi Hasegawa, Akiko Kitamura, Ishiguro Naoki, Ohno Kinji
7th International Conference on Children’s Bone Health (ICCBH) 2015
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Meclozine promotes longitudinal bone growth in transgenic achondroplasia mice with gain-of-function mutation in FGFR3 gene International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Kenichi Mishima, Naoki Ishiguro
2015 Pediatric Orthopaedic Society of North America (POSNA) Annual Meeting
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Meclozine enhances skeletal growth in transgenic achondroplasia mice with a constitutive active FGFR3 mutation International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Kenichi Mishima, Naoki Ishiguro, Kinji Ohno
2015 Annual Meeting - Orthopaedic Research Society (ORS)
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Meclozine facilitates proliferation and differentiation of chondrocytes by attenuating abnormally activated FGFR3 signaling in achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Hiroshi Kaneko, Kenichi Mishima, Naoki Ishiguro
2014 Pediatric Orthopaedic Society of North America (POSNA) Annual Meeting
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Meclozine facilitates chondrocyte proliferation and differentiation by attenuating abnormally activated FGFR3 signaling in achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Hiroshi Kaneko, Kenichi Mishima, Naoki Ishiguro, Kinji Ohno
International Skeletal Dysplasia Society (ISDS) Meeting 2013
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Drug repositioning for inhibiting the FGFR3 signaling in the treatment of short stature in achondroplasia International conference
Masaki Matsushita, Hiroshi Kitoh, Naoki Ishiguro, Kinji Ohno
2013 Annual Meeting - Orthopaedic Research Society (ORS)
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Guillain-Barré syndrome of children -diffficulty to diagnosis in the orthopedic field- International conference
Masaki Matsushita, Tadashi Hattori, Takahiko Kitakoji, Hiroshi Iwata
Asia Pacific Orthopaedic Association (APOA), Spine and Pediatric Sections 2011
KAKENHI (Grants-in-Aid for Scientific Research) 13
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整形外科領域の新規治療に向けたdrug repositioning戦略
Grant number：23K08610 2023.4 - 2026.3
科学研究費助成事業 基盤研究(C)
今釜 史郎, 三島 健一, 石塚 真哉, 竹上 靖彦, 松下 雅樹, 中島 宏彰
Authorship：Coinvestigator(s)
名古屋大学大学院医学系研究科 整形外科ではdrug repositioningに注目し、各稀少疾患に対し既存薬剤のoff labelの薬効を見出し新規治療法を開発する研究に注力してきた。本研究は、各プロジェクトを統合的に主導し、迅速かつ効率的に臨床応用まで進める事を目的とする。既に標的分子について予備的検討が済んでいる物質や企業導出が可能な段階の物質もあり、稀少疾患に加え、症例数の多い変形性関節症やサルコペニアに有効な薬剤も見出している。drug repositioning戦略に基づく疾患の病態解明と新規治療薬の開発を、整形外科各分野にわたり迅速かつ網羅的に進める。
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FGFR3インヒビターのマウスモデルへの長期投与と作用機序の検討
Grant number：22K09398 2022.4 - 2025.3
科学研究費助成事業 基盤研究(C)
松下 雅樹, 鬼頭 浩史, 三島 健一, 神谷 庸成
Authorship：Principal investigator
Grant amount：\4160000 （ Direct Cost: \3200000 、 Indirect Cost：\960000 ）
軟骨無形成症は骨伸長の抑制因子であるFGFR3が過剰に発現した指定難病である。ドラッグリポジショニングにより乗り物酔い止め薬としての使用実績のある内服薬であるメクロジンにFGFR3の抑制効果があることは見出されている。メクロジンを軟骨無形成症マウスモデルへ10日間定量的に経口投与すると骨伸長は促進された。本研究では、メクロジンのヒト軟骨無形成症への臨床応用に向けて、軟骨細胞におけるメクロジンの作用機序を明らかにし、メクロジンを成長期の軟骨無形成症マウスモデルに長期間投与することで全成長期にわたって骨伸長効果を発揮するための至適投与量を決定する。
ドラッグリポジショニングにより乗り物酔い止め薬としての使用実績のある内服薬のメクロジンに線維芽細胞増殖因子受容体3（fibroblast growth factor receptor 3 : FGFR3）シグナルの抑制効果があることが示されている。また、メクロジン1および2 mg/kg/dayを軟骨無形成症（achondroplasia：ACH）マウスモデルへ10日間定量的に経口投与すると濃度依存性に骨伸長は促進されることも証明されている。本研究では、メクロジンを成長期のACHマウスに長期間投与することで全成長期にわたって骨伸長効果を発揮するための至適投与量を決定することである。ACHマウスは麻痺を発症して一定数死亡するが、メクロジン2 mg/kg/dayをACHマウスに7日齢から56日齢まで投与すると生存率は有意に向上した。一方、生存したACHマウスの肝臓組織を解析すると明らかな肝細胞の肥大は認められなかったことより、成長期に長期間メクロジンを投与しても肝毒性は示さないと判断した。また、10日間の短期投与した時と同様に、メクロジンを長期間投与するとマウスの体長は促進された。マイクロCTにて各骨の長さを計測すると頭蓋骨、長管骨、脊椎の長さはメクロジン長期投与により促進された。ACHマウスは長管骨の骨幹端における海綿骨の骨梁形成は障害されているが、メクロジン投与により骨梁パラメータは改善した。さらに、メクロジンはACHマウスで認められる後弯変形を改善させた。次年度以降は脊柱管の解析を行っていく。
令和4年度は、２mg/kg/dayのメクロジンをACHマウスに7日齢から56日齢まで成長期に渡って長期間投与した。ACHマウスは野生型マウスと比較して体長は減少し、各骨（頭蓋骨、長管骨、脊椎）の骨伸長は抑制され、長管骨骨幹端における骨密度は低下している。メクロジンの長期間の投与により、これらのACHマウスの表現型を改善することを示すことができた。また、長期間投与しても肝毒性を呈さないことも判明した。一方、ACHマウスは麻痺により一定数死亡することが知られているが、メクロジン投与により死亡率が改善したことを示すことができた。また、ACHで認められる後弯変形もメクロジンにより改善した。今後は脊柱管の解析を行っていく予定である。
以上により、本研究はおおむね順調に進んでいると考えているが、実験の継続が必要な状態である。
令和4年度の結果より、メクロジン２mg/kg/dayをACHマウスに7日齢から56日齢まで長期間投与すると、明らかな毒性を呈さず、ACHマウスの体長は増加し、各骨（頭蓋骨、長管骨、脊椎）の骨伸長は促進され、骨密度は向上した。また、ACHマウスで認められる後弯変形もメクロジン投与により改善した。令和5年度以降は、長管骨の成長軟骨の組織学的解析を行いメクロジンによる骨伸長に与えるエビデンスを蓄積していく。また、脊柱管を解析することでメクロジン長期投与により死亡率が改善した原因を追究する。 -
小児大腿骨頭壊死症の線維化を中心とした病態解明と新規骨再生促進薬の開発
Grant number：22K09304 2022.4 - 2025.3
科学研究費助成事業 基盤研究(C)
三島 健一, 鬼頭 浩史, 松下 雅樹, 神谷 庸成
Authorship：Coinvestigator(s)
ペルテス病では、壊死骨が吸収されると線維性組織に置換されるため、新生骨の添加は遅延し力学的強度の低下が遷延する。不可逆的な骨頭変形を予防するには、骨吸収の抑制に加えて骨形成を促す強力な刺激と壊死組織の「線維化」を抑制する必要があると考えられる。本研究の目標は、骨壊死という難治性の病態を克服するため、大規模低・中分子化合物ライブラリーを使ったde novo創薬によって強力な骨再生促進薬を開発することと骨壊死領域に形成される線維性組織の分子生物学的な特徴を明らかにし、近年開発研究が進んでいる抗線維化治療の応用可能性を探ることである。
今期はTLR4拮抗薬であるLPS-RSの虚血性骨壊死に対する効果を調べた。実験はマウスの大腿骨遠位顆部を栄養する主要な血管4本を顕微鏡にて同定し、これらをすべて凝固焼灼して虚血性骨壊死を誘導する動物モデルを使用して行った。馴化した12週齢のC57BL/6雄マウスの左後肢に上記の手術操作を施し、術翌日から週に2回、4週間、LPS-RS 5 mg/kg (薬剤投与群)およびVehicle（対照群）の腹腔内投与を行った。実験中に削痩や脱毛を生じることはなかった。術後2、4、６週で安楽死させ、左後肢から膝関節を残したまま大腿骨と脛骨を採取し、HE染色やTRAP染色による組織学的評価やマイクロCTによる形態学的評価を行った。
術後2週時点では、壊死骨端における骨梁内empty lacunaeの個数には両群間に有意差を認めなかった。マイクロCTで定量評価した壊死骨端内の海綿骨の骨密度にも有意差はみられなかった。一方、薬剤投与群の方が組織学的には壊死骨端内の破骨細胞数は多い傾向がみられた。最終評価では術後6週時点では、壊死骨端の圧潰度に明らかな違いは確認されなかった。
Runx2は未分化間葉系細胞からの骨芽細胞分化に必須の転写因子である。今期はRunx2の発現や転写活性化能を上昇させ、骨芽細胞分化や骨形成を促進させ得る化合物スクリーニングを開始した。ヒトRunx2遺伝子の骨芽細胞分化に関わるP1プロモーター領域をサブクローニングしたルシフェラーゼベクターを安定発現する未分化間葉系細胞株を樹立し、スクリーニングを行った。一次スクリーニングには名古屋大学トランスフォーマティブ生命分子研究所 (ITbM)から供与を受けた800種類の基本骨格化合物を使用した。3回試行を行ったところ、16種類の化合物はランソプラゾールよりも高いプロモーター活性を示した。
今年度もコロナ禍によって年度当初は実験手技をサポートしてくれる実験助手や大学院生の活動時間の減少が続き、研究の進捗に少なからず影響した。感染の流行が落ち着き、TLR4拮抗薬単独の効果検証は開始できたが、当初の予定である複数種の薬剤を投与する実験系は実施できていない。また1次スクリーニングで同定された16種類の化合物の実際の効果を検証する実験系は実施できていない。
来期もマウス大腿骨顆部虚血性骨壊死モデルを使用し、TLR4拮抗薬単独あるいは水溶性ランソプラゾールとの併用投与による壊死骨の圧壊抑制効果を検証していく。今期の動物実験では壊死骨の骨代謝回転がTLR4拮抗薬によって亢進される可能性を示唆する結果が得られたが、骨端の圧潰抑制効果までは確認できなかった。そこでさらに用量あるいは投与回数を増やすこと（連日または隔日で１日複数回投与）によって骨端の圧潰予防が可能かどうかを検証する。また水溶性ランソプラゾール8 mg/kg/day投与群では、骨端の骨形成促進効果が確認できているため、骨壊死誘導後３週までの早期にTLR4の全身投与を行い、その後水溶性ランソプラゾールに切り換えさらに3週間全身投与を行う実験も予定している。
1次スクリーニングで同定された16種類の化合物の薬効を検証するため、細胞実験でRunx2の遺伝子や蛋白発現の定量評価、転写活性化能の評価、骨芽細胞分化の評価を予定している。 -
多階層シングルセル解析を応用した骨再生機構の解明と新規再生療法の基盤構築
Grant number：21H03124 2022.2 - 2025.3
科学研究費助成事業 基盤研究(B)
松下 祐樹, 尾崎 遼, 住田 吉慶, 松下 雅樹
Authorship：Coinvestigator(s)
成体における主な造血の場である骨髄には、様々な骨格系細胞が存在している。その中で骨格幹細胞は強力な骨芽細胞分化能を有しており、 再生医療に広く用いられている。しかしながら、生体内において時空間的に真の骨格幹細胞の動態を明らかにした研究はなく、再生医学の発展の障壁となっている。本研究では様々な骨格系細胞の多様性を明らかにした上で、骨格系細胞の分化系譜のヒエラルキーを同定する。さらに骨格幹細胞の骨芽細胞分化を制御する遺伝子とそのメカニズムを明らかにし、骨再生過程における骨格幹細胞の時空間的な細胞ダイナミクスを解明する。
成体における主な造血の場である骨髄は周囲を骨に囲まれており、間葉系幹細胞、間葉系前駆細胞、骨芽細胞、骨髄間質細胞など様々な骨格系細胞が存在している。その中で間葉系幹細胞は強力な骨芽細胞分化能を有しており、細胞培養や細胞表面マーカーにより単離され、再生医療に広く用いられている。しかしながら、生体内において時空間的に真の間葉系幹細胞の動態を明らかにした研究はなく、再生医学の発展の障壁となっている。本研究では多階層シングルセル解析により様々な骨格系細胞の多様性を明らかにした上で、それぞれの細胞の系譜追跡を行うことで真の間葉系幹細胞と骨格系細胞の分化系譜のヒエラルキーを同定する。さらに間葉系幹細胞の骨芽細胞分化を制御する遺伝子とそのメカニズムを明らかにし、骨再生過程における間葉系幹細胞の時空間的な細胞ダイナミクスを解明する。
本年はまず間葉系幹細胞の探索を行った。若齢マウスから、赤色蛍光色素で標識した様々な骨格系細胞を採取し、その多様性をシングルセル解析を用いて明らかにした。次にデータサイエンスの手法を用いて推定された幹細胞集団で強く発現する遺伝子、Fgfr3に着目し、タモキシフェン誘導性のCreERマウスを用いて、細胞系譜追跡を行った。骨髄において、Fgfr3陽性細胞は骨内膜に特異的に存在しており、これらの細胞は経時的に様々な骨格系の細胞へと分化した。これらのことから、骨内膜には骨の幹細胞が存在することが明らかになった。
当初の研究計画通り順調に進んでいる。
これまでに新たな骨の幹細胞を発見した。今後は骨再生過程における幹細胞を含む様々な骨格系細胞の動態を明らかにする。 -
Grant number：21H03063 2021.4 - 2024.3
Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Authorship：Coinvestigator(s)
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骨延長マウスモデルにおけるメクロジンのFGFR3抑制効果の検討
Grant number：20K09477 2020.4 - 2024.3
科学研究費助成事業 基盤研究(C)
神谷 庸成, 鬼頭 浩史, 三島 健一, 松下 雅樹, 長田 侃
Authorship：Coinvestigator(s)
軟骨無形成はFGFR3が異常に活性化し骨伸長が抑制される難病である。申請者のグループは、drug repositioningによりメクロジンがFGFR3インヒビターであることを見出し、Achマウスの骨伸長を促進したことを報告した。また、メクロジンはHypマウスの表現型をレスキューしたことを見出した。一方、Achマウスは骨延長における骨形成が亢進していることを報告した。本研究では、骨延長マウスモデルにメクロジンを投与し骨形成におけるメクロジンの効果を検討する。骨延長はAchマウスとhypマウスに行い、骨延長部を経時的にレントゲンおよび組織学的に定量しメクロジンの効果を非投与群と比較する。
研究代表者のグループは、乗り物酔い止め薬であるメクロジンが、軟骨無形成症(ACH)で過剰となっている線維芽細胞増殖因子受容体3（FGFR3）シグナル下流のMAPK経路を抑制するという知見をドラッグスクリーニング法により見出した。これを元に、過剰な線維芽細胞増殖因子23（FGF23）がFGFR3とFGFR1を介して骨石灰化障害を生じる低リン血症性くる病（XLH）マウスモデル（Hyp）においてもメクロジンで骨石灰化が改善されることも見出した。臨床において、これらの疾患で生じる低身長、下肢変形に対して骨延長・変形矯正治療を行うことがあるが、ACHでは骨形成が良好である一方で、XLHでは極めて不良である。本研究では、これらの疾患マウスモデルの骨延長モデルにおけるメクロジンの効果を検討し、それを通してFGFR3シグナルの骨形成おける役割を解明することである。2022年度までに野生型マウス、低リン血症性くる病マウス、高週齢の軟骨無形成症マウスおよびその閉経後骨粗鬆症（OVX）マウスモデルにおいて骨延長モデルの作成、薬剤投与、画像および組織標本の作成を行った。低リン血症性くる病マウスモデルでは延長部の骨形成は極めて不良で、メクロジンによる改善は極めて限定的であった。低週齢の軟骨無形成症マウスモデルでは延長骨の形成が良好であることは過去に報告していたが、高週齢の軟骨無形成症マウスモデルでは骨形成は野生型より不良となっており、さらにOVX処置を行うとさらに不良となった。しかし、高週齢の軟骨無形成症マウスとそのOVX処置後マウスから採取した骨髄由来間葉系幹細胞にメクロジンを添加すると骨分化が促進された。
低リン血症性くる病マウスにおけるメクロジンの効果、および高週齢の軟骨無形成症マウスとその閉経後骨粗鬆症モデルの骨延長モデルにおける検討は完了し、それぞれ論文投稿と受理が完了した。現在は低リン血症性くる病マウスモデルの骨延長モデルの画像解析と組織解析を継続している。
低リン血症性くる病マウスモデルの画像解析と組織評価を進めるとともに、その結果についての解析を行い、学会報告と論文作成を進めていく。 -
Grant number：19K09573 2019.4 - 2024.3
科学研究費助成事業 基盤研究(C)
三島 健一, 鬼頭 浩史, 松下 雅樹, 長田 侃, 神谷 庸成
Authorship：Coinvestigator(s)
ペルテス病の病態制御には、修復過程における①血管新生の遅延、②活発な壊死骨の吸収、③骨新生の抑制のそれぞれが治療ターゲットとなり得る。申請者らは既存薬であるランソプラゾールに骨形成促進作用が存在することを見出しており、骨吸収抑制薬にはすでにビスフォスフォネート製剤が使われている。骨壊死に続発する股関節炎の遷延は、血管新生の遅延や骨新生の抑制に関与するが、慢性炎症の薬物治療は関節リウマチや敗血症性ショックの基礎研究から開発が進んでいる。本研究の目的は骨壊死によって生じる３つの病態をドラッグリポジショニング薬剤と既存薬との併用療法によって改善することで、ペルテス病の自然歴の改変を試みることである。
Toll-like receptors (TLRs)は自然免疫応答において重要な役割を果たす抗原受容体である。壊死骨はTLRsの1つであるTLR4を介してマクロファージを活性化し、炎症性サイトカインを誘導することが報告されている。我々はこうした虚血性骨壊死後に生じる急性炎症を抑制することで骨壊死後の修復機転が活性化されるのではないかと考えている。今期はTLR4拮抗薬であるLPS-RSの虚血性骨壊死に対する効果を調べた。実験はマウスの大腿骨遠位顆部を栄養する主要な血管4本を顕微鏡にて同定し、これらをすべて凝固焼灼して虚血性骨壊死を誘導する動物モデルを使用して行った。馴化した12週齢のC57BL/6雄マウスの左後肢に上記の手術操作を施し、術翌日から週に2回、4週間、LPS-RS 5 mg/kg (薬剤投与群)およびVehicle（対照群）の腹腔内投与を行った。実験中に削痩や脱毛を生じることはなかった。術後2、4、６週で安楽死させ、左後肢から膝関節を残したまま大腿骨と脛骨を採取し、HE染色やTRAP染色による組織学的評価やマイクロCTによる形態学的評価を行った。
術後2週時点では、壊死骨端における骨梁内empty lacunaeの個数には両群間に有意差を認めなかった。マイクロCTで定量評価した壊死骨端内の海綿骨の骨密度にも有意差はみられなかった。一方、薬剤投与群の方が組織学的には壊死骨端内の破骨細胞数は多い傾向がみられた。最終評価では術後6週時点では、壊死骨端の圧潰度に明らかな違いは確認されなかった。
今年度もコロナ禍によって年度当初は実験手技をサポートしてくれる実験助手や大学院生の活動時間の減少が続き、研究の進捗に少なからず影響した。感染の流行が落ち着き、TLR4拮抗薬単独の効果検証は開始できたが、当初の予定である複数種の薬剤を投与する実験系は実施できていない。
来期もマウス大腿骨顆部虚血性骨壊死モデルを使用し、TLR4拮抗薬単独あるいは水溶性ランソプラゾールとの併用投与による壊死骨の圧壊抑制効果を検証していく。今期の動物実験では壊死骨の骨代謝回転がTLR4拮抗薬によって亢進される可能性を示唆する結果が得られたが、骨端の圧潰抑制効果までは確認できなかった。そこでさらに用量あるいは投与回数を増やすこと（連日または隔日で１日複数回投与）によって骨端の圧潰予防が可能かどうかを検証する。また水溶性ランソプラゾール8 mg/kg/day投与群では、骨端の骨形成促進効果が確認できているため、骨壊死誘導後３週までの早期にTLR4の全身投与を行い、その後水溶性ランソプラゾールに切り換えさらに3週間全身投与を行う実験も予定している。 -
Grant number：19K09646 2019.4 - 2024.3
科学研究費助成事業 基盤研究(C)
松下 雅樹, 鬼頭 浩史, 三島 健一, 長田 侃, 神谷 庸成
Authorship：Principal investigator
Grant amount：\4420000 （ Direct Cost: \3400000 、 Indirect Cost：\1020000 ）
メクロジンは軟骨細胞においてFGFR3シグナルを抑制し、ACHマウスモデルへの経口投与により骨伸長促進効果が認められている。本研究では、メクロジンによるACHの根本的治療開発に向けて、FGFR3シグナルにおけるメクロジンの作用機序を検討する。FGFR3シグナルのMAPK経路のうちERKの上流に位置するMEKやRAF、さらにSTAT経路に与える効果や生体内にユビキタスに発現しているERKのリン酸化に与える影響を検討する。また、ACHマウスモデルに各種濃度のメクロジンを投与して副作用が少なく最大限効果を発揮できる用量やACH以外のFGFR3シグナルが関連した疾患動物モデルにおける効果を検討する。
乗り物酔い防止薬の成分であるメクロジンは軟骨細胞において線維芽細胞増殖因子受容体3（fibroblast growth factor receptor 3 : FGFR3） シグナルを抑制し、軟骨無形成症（achondroplasia：ACH）マウスモデルへの経口投与により骨伸長促進効果が認められている。メクロジンはFGFR3下流のERKのリン酸化を抑制することはこれまでの研究で分かっているが、本研究では胎生期マウス脛骨の軟骨を用いた検討を行い、メクロジンはMAPK経路のうちERK経路およびp38経路に属する一部の遺伝子発現をメクロジンは抑制するというデータを得た。
これまでの研究で、7日齢のACHマウスモデル（Achマウス）に10日間メクロジンを投与したところ、1および2 mg/kg/dayで濃度依存性に骨伸長を促進した。令和元年度は、各種用量を投与し骨長を評価したところ、本プロトコールにおいてはメクロジン2 mg/kg/dayが、副作用が少なく最大限骨伸長効果を発揮できる用量と考えた。令和2年度以降は、メクロジン2 mg/kg/dayの有効性を検証するためにHypマウスの骨のosteoid volume/bone volume (OV/BV) を定量した。メクロジン2 mg/kg/dayはHypマウスのOV/BVを有意に減少させたことに加え、成長軟骨の構造を改善させることが判明した。しかし、メクロジン2 mg/kg/dayの投与によりHypマウスの血清カルシウムおよびリン値の上昇や、骨伸長促進効果は限定的であった。令和4年度には、マウスの骨髄間質細胞（bone marrow stromal cells：BMSCs）を採取してメクロジンを投与するとアリザリンレッド染色性が著名に向上したことから、メクロジンに骨石灰化能改善を認めることをex-vivoでも示すことができた。
令和元年度は、Achマウスにおいて2 mg/kg/dayがメクロジンの骨伸長効果を発揮する最も有効な投与量であることを示すことができた。令和2年度以降は、２mg/kg/dayのメクロジンを7日齢のHypマウスに同様のプロトコールで投与し、Hypマウスで増加しているosteoid volume/bone volume (OV/BV)や肥大軟骨細胞層の肥厚は減少したというデータを得た。一方、メクロジンはHypマウスで上昇しているFGF23はさらに上昇させ、マイクロCTによる各種海綿骨や皮質骨のパラメータはメクロジンの投与により変化しなかった。サンプルサイズを増やして検討を行ったところ、メクロジン投与によるOV/BVの減少や肥大軟骨細胞層の厚みの減少は再現性が確認されたが、Hypマウスの血清カルシウムおよびリン値の上昇や骨伸長促進効果は限定的であった。令和4年度には、マウスの骨髄間質細胞（bone marrow stromal cells：BMSCs）を採取してメクロジンを投与するとアリザリンレッド染色性が著しく向上したことからメクリジンは骨石灰化能を促進することをex-vivoでも示すことができた。
令和元年度に行ったcell freeキナーゼアッセイによりメクロジンはMAPK経路においてMAP3K3のリン酸化を抑制することが示唆された。令和2年度以降に胎生期マウス脛骨の軟骨を用いてRNAseqを行ったところ、メクロジンはFGF2により上昇した一部のMAPKファミリーカスケードに属する遺伝子発現を抑制したことと、MAPK経路のうちERK経路およびp38経路に属する一部の遺伝子発現を抑制したことを示した。しかし、cell freeキナーゼアッセイと軟骨を用いたRNAseqの結果に一部解離が認められる状態であることから、追加精査が必要な状態である。
これまでの研究よりメクロジンはMAPK経路においてMEK1/2のリン酸化を抑制することが予想されていた。しかし、令和元年度に施行したキナーゼアッセイでは、メクロジンはMEK1/2のリン酸化抑制効果は軽度だったのに対し、さらに上流のMAP3K3のリン酸化を抑制することが示唆された。令和2年度以降は、胎児マウスの軟骨を用いてRNAseqを行ったところFGFR3シグナル亢進によって上昇した複数のMAPKファミリーカスケードに属する遺伝子をメクロジンが抑制することを示した。また、MAPKのうちERKおよびp38経路に属する遺伝子発現はメクロジン投与により変動したが、JNKは変化しなかった。cell freeキナーゼアッセイと軟骨を用いたRNAseqの結果に一部解離が認められる状態であることから追加精査が必要な状態である。今後は、Rat chondrosarcoma（RCS）細胞にメクロジンを添加した後にFGF2を加えFGFR3シグナルが活性化した一定時間後にMAP3K3やMAP2K6のリン酸化抑制効果の評価に加え、ERK、p38、JNK経路における効果をウエスタンブロッティング法による検討を行う。
Achマウスで最も効果を発揮するメクロジン2 mg/kg/dayは、Hypマウスにおいて骨石灰化を有意に促進したが、骨伸長に対する効果や血清カルシウム値やリン値の変動には有意差を認めなかった。一方、マウスの骨髄間質細胞（bone marrow stromal cells：BMSCs）を用いたex-vivoでメクロジンの骨石灰化能促進効果を示すことができた。令和5年度には、BMSCsに発現しているERKにメクロジンの効果を検討していく。 -
Grant number：19K09596 2019.4 - 2021.3
科学研究費助成事業 基盤研究(C)
長田 侃, 鬼頭 浩史, 三島 健一, 松下 雅樹, 神谷 庸成
Authorship：Coinvestigator(s)
軟骨無形成症(achondroplasia: ACH）は骨伸長の抑制因子であるFGFR3の活性化により発症し、長管骨の長軸成長が障害され低身長を呈する骨系統疾患である。研究代表者らは、メクロジンが新規FGFR3インヒビターであると同定し、ACHマウスモデルへの全身投与により骨伸長を促進したことを報告した。本研究ではFGFR3インヒビターの局所投与による骨伸長促進効果を検討する。幼弱動物の片側関節内や骨端部にFGFR3インヒビターを局所投与し、マイクロCTで骨長を経時的に測定して非投与側と比較する。成長軟骨板の組織学的検討、骨端および骨幹端の骨量や骨梁に対する骨形態学的検討も加える。
特定の短縮した骨に対する治療法は、侵襲の大きい骨延長術しかない。本研究の目的は、マウスモデルへの全身投与により骨伸長促進効果が認められている線維芽細胞増殖因子受容体3（fibroblast growth factor receptor 3 : FGFR3）インヒビターの局所投与による骨伸長促進効果を検討することである。これまでに、4週齢の野生型マウスの膝関節に100μMのメクロジン30μLを計6回隔日投与し非投与側と比較検討したところ脛骨において有意な骨伸長効果を認めた。令和1年度には、軟骨無形成症(achondroplasia：ACH)マウスモデル（ACHマウス）を用いて同様に局所投与し、ACHマウスにおいても脛骨の有意な骨伸長効果を認めた。また、メクロジン最終投与後に蛍光カルシウムキレート剤2種を24時間差で腹腔内投与し24時間あたりの骨伸長量を定量すると、野生型マウスおよびACHマウスで、大腿骨と脛骨における骨伸長効果を認めた。最終年度である令和2年度は、メクロジンの至適局所投与量の検討を行った。100μMのメクロジン10μLを同様のプロトコールで野生型マウスに投与した。骨伸長および骨量は増加傾向であったものの30μL投与時よりは効果は小さいことから、100μMメクロジン10μLよりも30μLが有効と考えた。また、薬剤の膝関節局所投与による成長軟骨への移行を評価した。Indian inkを膝関節に投与し成長軟骨を組織学的に評価すると成長軟骨にIndian inkの染色性が認められた。
今後は、膝関節局所投与による骨伸長効果を示すデータを蓄積するために、成長軟骨の組織学的評価を追加する。また、メクロジン以外のFGFR3インヒビターによる局所投与の骨伸長効果も検討する。局所投与による選択的に骨伸長を促進する治療法が確立されれば非侵襲的な治療法の開発へ結びつく可能性がある。 -
Investigation of osteochondral function via activation of FGFR3 signaling
Grant number：17H04312 2017.4 - 2020.3
Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Kitoh Hiroshi
Authorship：Coinvestigator(s)
We demonstrated that new bone formation was accelerated during limb lengthening surgery and cartilage degeneration was inhibited via suppressing subchondral bone sclerosis in transgenic mice expressing activated fGFR3 signaling. We concluded that FGFR3 has a positive effect of bone regeneration and joint cartilage preservation. On the other hand, although it is known that FGFR3 signaling suppresses longitudinal bone growth, meclizine, which we found as a drug of FGFR3 inhibitor, significantly promoted bone growth in mice carrying a FGFR3 activating mutation. We determined that the optimal dose of meclizine on bone growth was 2mg/kg/day, and the minimal hepatotoxicity dose of meclizine was 8 mg/kg/day.
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Drug repositioning for successful healing of bone fractures or defects
Grant number：16K10854 2016.4 - 2020.3
Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
MISHIMA KENICHI
Authorship：Coinvestigator(s)
We previously reported that lansoprazole accelerated the physiological process of fracture healing in rats. At first, we sought to determine if insoluble lansoprazole could promote local bone formation when combined with beta-TCP bone substitutes in a rabbit cortical bone defect model. However, we failed to demonstrate their therapeutic efficacy because the materials were surrounded with dense granulomatous tissues. Next, we have developed soluble lansoprazole-impregnated artificial bones and evaluated their efficacy by applying to the model.In contrast to the previous experiments using insoluble lansoprazole, significant efficacy of soluble lansoprazole-impregnated bone graft substitutes on local bone accrual could be identified. These results indicate that brief exposure of resident and circulating osteoblastic lineage cells to lansoprazole can be sufficient to enhance local bone regeneration in vivo without apparent cytotoxicity.
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Grant number：15K15548 2015.4 - 2018.3
Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
Kitoh Hiroshi
Authorship：Coinvestigator(s)
Fibrodysplasia ossificans progressiva (FOP) is a severely disabling heritable disorder of connective tissue characterized by progressive heterotopic ossification in various extraskeletal sites. FOP is caused by a gain-of-function mutation in ALK2, which causes up regulation of a transcriptional factor, Id1. We screened FDA-approval drugs for suppression of the Id1 promoter activated by the mutant ALK2 in C2C12 myogenic cells. We found that azelastine HCl (anti-histamine), Fluvastatin sodium salt (ant-hyperlipidemia), and Trimipramine maleate salt (anti-depressant) suppressed the Id1 promoter activity in a dose-dependent manner. These drugs also downregulated the expressions of the Id1-target osteoblastic genes such as alkaline phosphatase and osteocalcin.
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Animal study for evaluating the effect of meclozine on FGFR3 signaling
Grant number：15K10439 2015.4 - 2018.3
Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Matsushita Masaki
Authorship：Principal investigator
Grant amount：\4810000 （ Direct Cost: \3700000 、 Indirect Cost：\1110000 ）
Achondroplasia (ACH) is characterized by short stature associated with severe complications such as stenoses of foramen magnum and spinal canal due to the gain-of-function mutation in fibroblast growth factor receptor 3 (FGFR3). We have already found that meclozine, an anti-histamine drug that has long been used for motion sickness, inhibited FGFR3 signaling. In the current study, the 1 or 2 mg/kg/day of meclozine increased the bone length of 7-day-old Ach mice for 10 days, but did not rescue the foramen magnum stenosis. Meclozine administration would be commenced immediately after birth since the synchondroses around the foramen magnum was closed at the age of 4.5 days. On the other hand, the 1 or 2 mg/kg/day of meclozine increased the bone volume and bone mineral density in addition to the bone length in growing Ach mice.